C型凝集素受体DCIR在特应性皮炎异常免疫应答中的作用及机制研究

Allergen-PRR-DC-T cell axis dysfunction plays an important role in the pathogenesis of atopic dermatitis. Dendritic cell immune receptor (DCIR) is a member of CLRs and has an immune receptor tyrosine based inhibitory motif (ITIM) in the cytoplasmic tail, which is believed to play a negative role in infectious and autoimmune diseases, but not clear is the exact mechanisms in the pathogenesis of allergic diseases. Our previous studies have showed that DCIR expression levels were lower in the lesions of AD patients than that in the healthy donors, and the maturation status of DC was inhibited by house dust mite (HDM)-DCIR stimulation. To explore the function of DCIR in abnormal immune response , prevention and treatment of AD, we proposed to study the following questions with skin samples, monocyte derived DCs, and DCIR-KO mice: ①The expression levels of DCIR in the lesions and non-lesions skin of AD; ②Binding ability analysis of DCIR with allergens; ③The key molecular mechanisms that mediated DCs activation through DCIR and the polarization of naïve T cells; ④Evaluation of the prevention and treatment effect of HDM induced inflammation by targeting DCIR. Through the above series studies, we try to verify the function and mechanism of DCIR in AD. After having retrieved the published papers, we can not find any relevant reported studies.

过敏原-PRR-DC-T细胞轴功能异常在特应性皮炎（AD）发病中扮演重要角色。树突状细胞免疫受体（DCIR）是具有免疫受体酪氨酸抑制基序(ITIM)的C型凝集素受体，在感染和自身免疫性疾病的免疫应答中起负向调节作用，但在过敏性疾病中的作用机制尚不明确。课题组前期研究发现：与健康人比较，AD皮损处DCIR表达量降低；DCIR可抑制尘螨抗原介导的DC活化成熟。为探索DCIR在AD异常免疫应答中的作用和探索靶向DCIR对AD的防治作用，本课题拟在体外试验、细胞试验和动物试验等多个层次进行以下研究：①DCIR在AD患者皮损和非皮损处的表达情况；②DCIR与过敏原结合能力；③尘螨-DCIR抑制尘螨诱导DC活化的分子机制和对初始T细胞增殖和极化的影响；④靶向DCIR在防治尘螨经皮致敏中的作用。可望通过上述研究，能较全面揭示DCIR在AD发病中的作用和机制。检索已发表文献，未见AD此方面的研究。

特应性皮炎（atopic dermatitis，AD）是一种具有代表性的过敏性疾病。在过去的三十年间，该病的发病率快速攀升。学界认为AD发病是在一定遗传背景下，皮肤屏障功能异常，过敏原引发异常免疫反应的结果。皮肤内的树突状细胞（dendritic cells, DCs），因其表面的模式识别受体（pattern recognition receptor，PRR）可识别外界抗原，进而调节T淋巴细胞应答，在AD的免疫反应中发挥重要作用。很多AD患者易感过敏原都富含多糖结构，研究显示多种CLRs如MR，DC-SIGN，Dectin-1和DCIR等可识别、摄取多糖抗原，通过不同的细胞内信号分子的级联活化而调节T细胞应答，从而产生免疫活化或免疫抑制。文献指出，DCIR胞浆内含有ITIM (immunoreceptor tyrosine based inhibitory motif) 基序负向调节免疫应答，DCIR主要摄取含甘露糖、海藻糖的抗原，但活化CD4+ T细胞功能较弱，并且多糖抗原同时作用 DCIR和DC-SIGN可影响DC-SIGN对抗原的内化，降低DC-SIGN对抗原的递呈，抑制CD4+ T细胞活化。本项目进行了DCIR作为CLRs受体的功能研究。进行了DCIR表达与AD表型和严重程度的相关性分析研究。进行了OVA-mannan-PLGA-NP的构建，证明与OVA等量化，且没有对培养细胞产生细胞毒性。进行了OVA-PLGA-NP的功能研究。分别从以上实验证实了DCIR可与多数的抗原蛋白结合且呈浓度依赖性， DCIR可识别并内吞尘螨抗原进入细胞内。证明CLRs另一个重要受体DC-SIGN在纳米颗粒的识别内吞中发挥重要的作用，且OVA-mannan-PLGA-NP可以抑制hMoDCs的成熟，并能诱导Treg极化，抑制Th2细胞的极化。最后通过小鼠在体研究，经OVA-mannan-PLGA-NP免疫治疗的小鼠可以缓解OVA的经皮致敏作用，预防OVA致敏作用。.本研究通过体内外实验证明OVA-mannan-PLGA-NP纳米疫苗可以通过CLRs受体介导耐受性DCs和Treg细胞产生，从而可以预防和治疗OVA的经皮致敏作用。