姜黄素影响α-synuclein过表达诱导的α-synuclein寡聚体形成的动力学及mitoKATP通道改变的研究

帕金森病（Parkinson disease，PD）是常见于中老年人群的第二大神经系统退行性疾病，发病机制尚不明确，治疗也存在许多缺陷和不足。本课题综合应用生物医学、生理学、药理学等多学科技术，创新性研究天然药物姜黄素对α-突触核蛋白过表达诱导α-突触核蛋白寡聚体形成的动力学、线粒体膜电位及线粒体ATP 敏感性钾通道改变的影响， 从细胞分子及离子通道水平上研究天然药物姜黄素的药理作用和量效关系，为寻求PD临床治疗学突破及为研发天然抗PD药物打下基础。课题拟在我们前期工作的基础上，应用免疫印迹、双抗体夹心酶联免疫吸附、免疫荧光双重标记法从细胞分子水平探讨姜黄素对细胞内α-突触核蛋白寡聚体的形成、演变及在细胞内的转运，分布的影响;以JC-1、激光共聚焦观察其对线粒体膜电位的影响；应用全自动膜片钳从离子通道水平探讨靶药物是否通过改变线粒体ATP 敏感性钾通道抑制细胞凋亡，探索PD治疗的新靶标。

帕金森病是常见于中老年人群的第二大神经系统退行性疾病，发病机制尚不明确，治疗也存在许多缺陷与不足。本课题综合应用生物医学、药理学、生理学等多学科技术，创新性研究我国传统中药姜黄素对α-突触核蛋白过表达诱导α-突触核蛋白寡聚体的形成、线粒体膜电位改变及线粒体ATP 敏感性钾通道的改变的影响，从细胞水平及离子通道水平上研究姜黄素的药理作用和量效关系，为寻求PD临床治疗学的突破及为研发天然抗帕金森病药物打下基础。课题在我们前期的研究基础上，应用免疫印迹及斑点杂交从细胞蛋白水平探讨姜黄素对细胞内α-突触核蛋白寡聚体的形成，应用JC-1及LDH检测线粒体膜电位及细胞膜毒性损伤；细胞膜片钳观察mitoKATP的改变。结果显示α-synuclein基因过表达或突变诱导均可促进α-synuclein寡聚体形成，姜黄素可明显减弱α-synuclein基因过表达或突变诱导的α-synuclein寡聚体形成；JC-1及LDH结果提示姜黄素可抑制α-synuclein基因过表达或突变所导致的线粒体膜电位及细胞毒作用；姜黄素下调α-synuclein基因过表达所诱导的Kir6.2蛋白表达，线粒体敏感性钾离子通道阻断剂5-HD可阻断姜黄素预处理对mitoKATP的改变。 研究首次发现，姜黄素可抑制 α-synuclein基因过度表达或突变诱导的α-synuclein寡聚体形成；姜黄素可能通过稳定线粒体膜电位阻断了α-synuclein基因过表达或突变所导致的细胞凋亡；姜黄素可能通过开放mitoKATP-Kir6.2通道拮抗α-synuclein基因过表达或突变所导致的细胞毒性。