基于VEGF信号网络调控探讨益肾祛瘀复方扶肾颗粒抑制腹膜血管生成延缓尿毒症腹膜透析超滤衰竭的机制研究

The subject is a depth study of which is previous National Natural Science Foundation, the National Authority in industry-specific issues and Tianjin Natural Science Foundation and other projects. Peritoneal ultrafiltration failure is an important pathologic basis of the treatment failure in maintaining peritoneal dialysis.Previous studies have demonstrated YishenQuyu can effectively delay the process of ultrafiltration failure in uremia peritoneal dialysis, of which interference pathway is related to inhibition of peritoneal angiogenesis. From the point of regulating of signal transduction networks, inhibitting angiogenesis peritoneum, and delaying the process of ultrafiltration failure in uremia peritoneal dialysis, introducing improved contour method, and stereology about principles and methods, using techniques in pathology, and molecular biology, the study is to evaluate the intervention effect of FushenKeli, of which the carrier of YishenQuyu in ultrafiltration failure about uremic animal model of peritoneal dialysis, and to determine the optimal dose synergy. Using cultured endothelial cells, the study is also to identify FushenKeli of combinations of different parties and intervente possible target differences in peritoneal angiogenesis. Confirming the hypothesis of which YishenQuyu Compound FushenKeli can delay the process of ultrafiltration failure in uremia peritoneal dialysis by regulating VEGF/VEGFR-2 and mediated Ang-2/Tie-2, Dll4/Notch signaling network, and inhibite peritoneal angiogenesis, and sequentially build rich theoretical connotation and research foundation generalized in Yishen Quyu treatment system.

本课题为既往国家自然科学基金、国家中管局行业专项课题及天津市自然科学基金等项目的纵深研究。腹膜超滤衰竭系维持性腹膜透析治疗失败的重要病理基础。既往研究证实益肾祛瘀法可有效延缓尿毒症腹膜透析超滤衰竭进程，干预途径与抑制腹膜血管生成有关。本研究拟从“调控信号网络转导，抑制腹膜血管生成，延缓尿毒症腹膜透析相关超滤衰竭进程”视角，引入改良等高线法、体视学等原理与方法，采用病理学、分子生物学等技术手段评价益肾祛瘀法载体扶肾颗粒对尿毒症腹膜透析动物模型超滤衰竭干预效应，并确定其最佳协同剂量；采用内皮细胞培养，鉴别扶肾颗粒不同拆方组合干预腹膜血管生成可能存在的靶点差异。证实“益肾祛瘀法复方扶肾颗粒通过调控VEGF/VEGFR-2及其介导Ang-2/Tie-2、Dll4/Notch信号网络，抑制腹膜血管生成，延缓维持性腹膜透析超滤衰竭”的假说，为序贯构建广义益肾祛瘀法治疗体系丰富理论内涵与研究基础。

背景：腹膜透析作为终末期肾功能衰竭的重要替代治疗手段，极大地延长了ESRF病患生存时间、改善其生存质量。然而，半数以上维持性腹透患者因腹膜超滤衰竭而最终退出治疗。近年来，针对腹膜血管的研究证实，腹膜转运屏障中以毛细血管为代表的血管壁溶质转运在腹膜超滤衰竭进程中发挥重要影响。基于“腹膜血管病变防治，延缓腹膜透析超滤衰竭”的科学研究可能成为今后腹膜透析相关领域研究的热点与难点问题。前期研究证实，“益肾祛瘀法”载体复方扶肾颗粒可有效改善腹膜纤维化模型大鼠腹膜超滤功能，下调腹膜胶原纤维过度积聚及纤维母细胞计数，抑制腹膜血管生成，并下调血清VEGF异常表达水平。但有关“益肾祛瘀法”干预尿毒症腹膜透析背景下腹膜血管生成的科学研究及机制阐释尚未系统开展。因此，本研究将探索“益肾祛瘀法”通过抑制腹膜血管过度生成实现腹膜超滤衰竭进程的干预机制及其与调控VEGF相关信号网络改变的关系。.主要研究内容：本项目采用药物干预动物实验，结合病理学、体视学、分子生物学及中药药理学等技术手段，多角度分析益肾祛瘀法复方扶肾颗粒抑制尿毒症腹膜透析背景下腹膜血管异常生成的有效性；利用体外细胞培养技术，观察腹膜血管内皮细胞VEGF/VEGFR-2及其介导的Ang-2/Tie-2，Dll4/Notch信号网络改变。.结果：本研究证实“益肾祛瘀法复方扶肾颗粒通过调控VEGF/VEGFR-2及其介导Ang-2/Tie-2，Dll4/Notch信号网络，抑制腹膜血管生成，实现延缓维持性腹膜透析超滤衰竭”的科学假说的真实性。.科学意义：本研究通过打破既往慢性肾脏病病变阶段划分，为基于血管病变、特别是微血管病变程度开展相关中医药防治提供了广阔科学研究空间。作为序贯科学研究转捩点，丰富益肾祛瘀法理论内涵，奠定研究转型实验基础的重要组成部分。同时作为益肾祛瘀法系列研究向多学科、多维面复杂交叉系统研究发展的拐点，在扶肾颗粒自体优化与前瞻性药效评价研究领域开展了有益的探索。