杏仁核脑区EphrinB2/EphB2信号通路异常介导的负性情绪增强在抑郁症中的作用

Numerous clinical studies demonstrate that negative emotions in depressive patients are closely related to the hyperactivity of amygdala mediated by the increase in the surface expression of NMDA receptor. Previous studies show that EphrinB2/EphB2, one of the member of receptor tyrosine kinase family are key regulators of synaptic localization of NMDA receptors. Our preliminary experiments found that the level of EphB2 protein in amygdala was significantly increased in the depression-susceptible mice, but not in other brain areas. Therefore, we hypothesized that the overexpression of EphrinB2/EphB2 signaling pathway in amygdala of depressive patient promoted the synaptic locolization and function of NMDA receptors to increase the amygdala response to negative emotions, resulted in depressive behavior. In this study, the in vitro and in vivo chronic stress models will be employed. The effects of regulation of EphrinB2/EphB2-mediated signaling pathway on the expression, distribution and function of NMDA receptors will be investigated. It is helpful to understand the role and underlying mechanism of the abnormalities of aversive signaling pathway in major depressive disorders. Our study will provide new target and strategy for the treatment of major depressive disorders and other affective disorders.

临床资料表明，抑郁症患者负性情绪与杏仁核脑区活动增强密切相关，该脑区NMDA受体膜表达亦明显增加。受体酪氨酸激酶EphB2受体及配体EphrinB2是介导NMDA受体膜定位的重要分子。预实验发现，抑郁敏感鼠杏仁核区EphB2蛋白水平较对照组和抵抗组明显增加，其他脑区无明显变化。因此本课题提出，抑郁症可能存在杏仁核区EphrinB2/EphB2信号通路增强，增加NMDA受体的膜簇集和定位，使NMDA受体功能上调，从而促进杏仁核脑区活动，形成持续的负性情绪，介导抑郁症发生发展。本课题拟通过建立应激的体外模型及动物模型，调控EphrinB2/EphB2信号通路不同节点，观察NMDA受体表达、分布及功能改变，探讨杏仁核脑区EphrinB2/EphB2信号通路异常在抑郁症中的作用，为抑郁症防治提供新靶点和新策略，为阐明"厌恶通路"在抑郁症中的意义及机制提供实验依据，为其他情感障碍性疾病防治提供新思路

近年来，由于抑郁症发病率的升高及其危害性，且传统抗抑郁药在临床治疗中的有效率偏低，因此对抑郁症发病机制及靶点研究的探索在不断深入。EphB2受体是酪氨酸激酶受体家族中的重要一员，在中枢神经系统具有重要的调控作用。研究报道，阿尔茨海默病、疼痛、焦虑等疾病的产生皆与脑内EphB2受体水平失调有关。然而，抑郁症的发病过程是否与脑内EphB2受体水平失调有关，调控EphB2受体是否影响抑郁行为，目前仍鲜见报道。本实验通过应用CSDS建立抑郁症小鼠模型，结合行为学、western blotting实验、shRNA介导的基因干扰技术、全细胞膜片钳技术，探讨杏仁核区EphB2受体在抑郁症中的作用及机制。主要结果发现，抑郁模型小鼠杏仁核区的EphB2受体表达上调，沉默杏仁核区的EphB2受体可逆转CSDS引起的小鼠抑郁样行为。杏仁核区给予EphrinB2-Fc激活EphB2受体，然后进行阈下社会挫败应激，可引起小鼠的抑郁样行为。抑郁模型小鼠杏仁核区锥体神经元的mEPSC幅度增加，该增加主要表现在NMDA-mEPSC的幅度增加，NMDA/AMPA 比值增加，GluN2A和GluN2B所介导的电流增加，给予LV-EphB2 shRNA后，可逆转上述增加。Western blotting实验表明，抑郁模型小鼠杏仁核区NMDA受体各亚基（GluN1、GluN2A、GluN2B）的膜表达均增加，给予EphrinB2-Fc后进行阈下社会挫败应激，可增加上述NMDA受体各亚基的膜表达。综上所述，本研究结果提示杏仁核区EphB2受体表达增加介导CSDS所致小鼠抑郁样行为，其机制是通过上调突触后NMDA受体各亚基的膜表达和功能。本研究为深入探讨杏仁核区EphB2受体在精神疾病发生发展中的作用提供了可靠的实验依据，也为抑郁症的药物治疗提供了新靶点和新方向。