小干扰核糖核酸和促红素衍生肽对肾缺血再灌注和环胞素A损伤的长期效应、机制及其基因表达谱的变化

缺血再灌注损伤是肾移植中不可避免的，并与其存活率密切相关。Caspase-3能通过调控细胞凋亡、炎症和纤维化来影响移植相关肾损伤的进展。我们前期研究表明 caspase-3 小干扰核糖核酸（siRNA）可下调caspase-3、抑制肾脏固有细胞凋亡，而重组促红素可上调caspase-3、促进炎症细胞凋亡，两者通过不同机制减轻炎症，保护急性缺血再灌注损伤。免疫抑制剂毒性损伤是慢性移植肾失功的另一重要因素，我们前期实验显示环胞素A能引起缺血再灌注肾脏的慢性炎症。本课题拟应用肾缺血再灌注及环胞素A毒性损伤的大鼠模型进一步研究caspase-3 siRNA或/和新型组织保护促红素衍生肽的长期效应、作用机制和信号通路，并建立肾缺血再灌注和环胞素A毒性损伤及相关治疗的基因表达谱，以筛选有效且低创伤的诊断和治疗的生物学指标及siRNA特异性干预的新靶点，改善移植肾的质量和长期存活率。

急性肾损伤是十分普遍的临床问题，不仅移植肾无法避免，也常见于固有肾；其死亡率居高不下，并可致慢性肾损伤及终末期肾病。新近的普查表明急性肾损伤在中国的漏诊率及肾毒性药物的暴露率分别为74%和72%，明显高于西方国家。.本课题成功建立了多种缺血再灌注（IR）和/或环胞素A（CsA）毒性肾损伤的大、小鼠及离体猪肾模型，用来验证了新型促红素衍生肽HBSP和CHBP的肾组织保护效应、作用机制和信号通路。这部分研究已发表了3篇中文和3篇SCI论文，1篇中文综述；另有1篇中文论文及1篇英文综述被接收待发表。我们进而研究了裸露的caspase-3 siRNA对肾小管细胞及猪自体移植肾的保护作用，并对其相关机制、机体的代偿反应及用药安全性进行了系统研究，发表了3篇SCI论文，单篇最高影响因子7.0, 1篇已发表的SCI综述及一已接收的书稿章节。.上述两部分的研究结果阐明了caspase-3、凋亡及炎症在肾损伤和肾保护中的关键作用，提供了caspase-3作为潜在诊治靶点的依据，还说明抑制caspase-3为促红素衍生肽肾保护的机制之一。另外，小鼠IR+/-CHBP和/或caspase-3 siRNA，以及猪自体肾移植模型基因表达谱的变化正在分析完善中。研究该类肾损伤及相关治疗基因表达谱的变化，可为筛选有效的诊治生物学指标，以及siRNA 特异性干预的靶点奠定基础，以期最终改善肾功能。还有4篇摘要在国内外会议多次交流，其文章正在准备中。.本课题的科学意义在于利用多种肾损伤的生物学模型，从体外细胞、离体器官到在体大、小鼠和猪模型，进行了一系列基础医学研究，特别是与细胞凋亡和炎症相关的caspase-3表达及siRNA和/或HBSP及CHBP干预，为临床应用的转化、个体化治疗及精准医学提供了殷实的依据。另外，利用该课题研究建立了国内外的学术合作及交流，不仅发表了相关的科研论文、综述及书稿章节，增加了课题申请人在同行中的影响，为后续成功申请基金提供了良好的平台，而且培养了博士和硕士研究生，以及青年科研人员和医生的团队。