PPAR-γ经CD200-CD200R1轴调控小胶质细胞活化对RGCs凋亡的影响

The abnormal activation of microglia plays an important role in retinal ganglion cells (RGCs) apoptosis. Previous studies reported that PPAR-γ via CD200R1 suppressed microglia activation, and CD200-CD200R1 interaction played the role of the switch in this process. We have found that PPAR-γ participated in retinal microglia activation via CD200R1. However, the role of PPAR-γ and CD200-CD200R1 signaling in RGCs apoptosis is still unclear. Therefore, we speculated that PPAR-γ via CD200-CD200R1 signaling regulates microglial activation responses in inhibition of RGCs apoptosis. We aim to determine the involvement of PPAR-γ and CD200R1 in retinal microglia activation; investigate the effect of the interaction of CD200-CD200R1 in retinal microglia activation and RGCs apoptosis in microglia-RGCs co-culture; evaluate the effect of PPAR-γ and CD200-CD200R1 intervention on retinal microglia activation, RGCs apoptosis and visual function. These results will provide new theoretical basis and molecularly targeted therapy for the treatment of retinal degenerative diseases.

小胶质细胞异常活化在RGCs凋亡中发挥着重要作用。文献报道，PPAR-γ可通过CD200R1抑制小胶质细胞活化，而CD200-CD200R1信号轴对该效应可能发挥着“开关”作用。课题组前期研究证实了PPAR-γ经CD200R1参与了视网膜小胶质细胞活化，但其在RGCs凋亡中的作用尚不清楚。基于此，我们提出假说：PPAR-γ经CD200-CD200R1轴调控小胶质细胞活化，进而抑制RGCs凋亡。课题组拟首先明确PPAR-γ经CD200R1在视网膜小胶质细胞活化中的作用；在此基础上，通过小胶质细胞和RGCs混合培养，明确CD200-CD200R1轴在上述效应和RGCs凋亡过程中扮演的角色；最终在整体水平中，靶向干预PPAR-γ和CD200-CD200R1轴，分析其对视网膜小胶质细胞活化、RGCs凋亡和视功能的影响。课题的研究结果可为视网膜退行性疾病的防治提供新的理论基础和分子靶点。

小胶质细胞异常活化在RGCs凋亡中发挥着重要作用。文献报道，PPAR-γ可通过CD200R1抑制小胶质细胞活化，而CD200-CD200R1信号轴对该效应可能发挥着“开关”作用。课题组前期研究证实了PPAR-γ经CD200R1参与了视网膜小胶质细胞活化，但其在RGCs凋亡中的作用尚不清楚。基于此，我们提出假说：PPAR-γ经CD200-CD200R1轴调控小胶质细胞活化，进而抑制RGCs凋亡。本课题主要取得了下述研究成果及科学意义：（1）为探索具有抗炎作用的CD200R1激动剂（CD200Fc）抑制视神经夹伤（ONC）后视网膜胶质细胞过度活化和RGCs凋亡假说。ONC模型建立后立即玻璃体内注射CD200Fc，5天后取材。结果显示CD200Fc通过抑制RGCs凋亡，进而保护ONC导致的RGCs数量丢失，同时导致ONC后胶质细胞活化减少和促炎细胞因子（COX-2、iNOS、MCP-1、TNF-α、IL-8）表达降低。同时，CD200Fc可增加ONC刺激下的大鼠视网膜抗炎细胞因子IL-10的表达。最后，我们发现CD200Fc显著抑制了ONC诱导的大鼠视网膜CD200表达的增加，并进一步提高了ONC诱导的CD200R1表达增加。我们的结果表明，CD200Fc在ONC大鼠模型中的抗炎作用是通过CD200与CD200R1的相互作用抑制视网膜胶质细胞的活化，同时发挥了抑制RGCs过度凋亡的作用。（2）为验证PPAR-γ对CD200及其受体的影响，进行低氧刺激的视网膜小胶质细胞模型检测。结果显示PPAR-γ两个主要功能区域（N端和C区）均在低氧诱导的小胶质细胞中显著增加，同时，CD200及其受体R1（CD200R1）也具有同样的升高效应。利用PPAR-γ内源性激动剂(15d-PGJ2)和靶向PPAR-γ基因shRNA病毒载体（sh-PPAR-γ）进行干预下，可以证实在低氧刺激的视网膜小胶质细胞中，PPAR-γ对CD200及其受体CD200R1具有正向调控潜能，同时PPAR-γ可能经CD200抑制低氧诱导的小胶质细胞炎症因子表达。（3）我们进一步拓展了课题的研究内容，测试了法苏地尔药物在治疗视神经损伤中的作用；分析了Wip1和NF-κB相互作用在视网膜星形胶质细胞炎性活化中的作用；视网膜静脉阻塞下脉络膜厚度变化。本课题研究结果将为视神经损伤相关疾病治疗提供理论依据及新的分子靶点。