结核菌酪氨酸磷酸酶（PtpA）小分子抑制剂的筛选及其对潜伏期分子机制研究

由于耐药结核菌的出现以及艾滋病造成的免疫缺陷易感人群增多，结核病对公众健康和安全的威胁越来越大，开发新型的可以根治结核病顽疾的药物迫在眉睫。PtpA 蛋白干扰宿主巨噬细胞的信号转导途径，是结核分枝杆菌感染人类巨噬细胞所必需的新药靶，文章发表在2008年cell子刊。通过国际合作我们已经克隆表达和纯化到活性PtpA蛋白，拟通过针对PtpA的高通量药物筛选模型配合抗BCG（携带荧光质粒卡介苗）和H37Rv（强毒株）的细胞水平筛选模型，从自主构建的海洋微生物天然产物库中，筛选得到既可以杀死TB又可以防止其潜伏的化合物分子，同时基于用TB感染的人类巨噬细胞模型来评价这些化合物的实际活性和毒性。?以此为小分子探针，测定特定抑制剂的亚致死剂量对药物作用靶点转录组表达，蛋白质组和代谢物组的差异影响等，来阐明PtpA在耐药结核菌潜伏期的分子机制，为药物发现奠定基础。

PtpA 蛋白干扰宿主巨噬细胞的信号转导途径，是结核分枝杆菌感染人类巨噬细胞所必需的新药靶。通过国际合作我们已经克隆表达和纯化到活性PtpA 蛋白，通过针对PtpA 的高通量药物筛选模型配合抗BCG（携带荧光质粒卡介苗）和H37Rv（强毒株）的细胞水平筛选模型，筛选样品8000 余个，发表活性化合物文章6 篇。从自主构建的海洋微生物天然产物库中，筛选得到既可以杀死TB 又可以防止其潜伏的化合物分子，同时基于用TB 感染的人类巨噬细胞模型来评价这些化合物的活性和毒性。通过项目的执行我们筛选到了吲哚满二酮类化合物，并通过SAR 分析优化了其结构，在体内证明了其生物活性，同时通过表面等离子体共振方法对小分子和酶的结合常数进行了测试。