温补肾阳祛风散寒法对肾阳虚型围绝经期模型大鼠内分泌免疫网络调控及细胞调亡相关因子的影响和作用机理研究

1..研究方法：通过构建肾阳虚型围绝经期大鼠模型，建立更年汤组、教材方组、利维爱组、老年组、青年组。运用放射免疫检测法，免疫组化及原位杂交等技术对各组进行相关指标检测，分析并阐明更年汤治疗围绝经期综合症的作用机理及其优点。2.研究内容：检测肾阳虚型围绝经期模型大鼠各组的E2、P、LH、FSH、GnRH、ER、ERmRNA、Bax、BaxmRNA、Bcl-2、Bcl-2mRNA、IL-6子宫卵巢指数、卵巢形态、阴道脱落细胞、骨密度及卵巢颗粒细胞的凋亡状态，并进行对比分析。3.预期结果：证明更年汤对肾虚型围绝经期大鼠的生殖内分泌有改善作用，对卵巢的颗粒细胞凋亡有抑制作用；明确更年汤的疗效机理。4..理论意义：更年汤对围绝经期综合症的治疗蕴含了中医理论的温肾补阳之法、又有袪风散寒通络以助阳的理论创新之意。5.应用前景：为中医理论的开拓性运用、中药替代性激素治疗、中药现代化提供可靠的实验依据。

目的：探讨蕴含补肾温阳、祛风散寒的更年汤对证型明确的肾阳虚证大鼠模型生殖内分泌、下丘脑、卵巢、子宫、肾上腺相关指标的影响及作用机理，为中药现代化提供可靠的实验依据。方法：选用自然老化的围绝经期雌性SD大鼠，肌注氢化可的松构建肾阳虚型围绝经期大鼠模型，将模型大鼠随机分为更年汤组、教材方组、替勃龙组和模型组；另选青年组、老年组SD雌性大鼠作为对照组。各组给予相应药物治疗15天后处死大鼠，取血、剖取相关组织器官进行指标检测。结果：更年汤组能明显增加子宫指数（P<0.05）；能抑制子宫萎缩，与教材方比较有显著性差异（P<0.01）；能上调子宫上ER、ERmRNA、VEGF、VEGFmRNA、HSP70、HSP70mRNA的表达水平（P<0.05）；可明显提高血清E2、P水平，并可下调FSH水平（P<0.05），与教材方组及替勃龙组比较差异无统计学意义（P>0.05）；可显著降低血清IL-6、LH、GnRH水平（P<0.01），其下调作用较教材方明显（P<0.05）；对ALT和Cr的影响无统计学意义（P>0.05）；可使卵巢指数显著增加（P<0.01）；卵泡发育情况优于教材方组（P<0.05）；在卵泡闭锁、卵泡扩张情况方面较替勃龙组、教材方组效佳（P均<0.05）；可上调卵巢颗粒细胞抑制凋亡因子Bcl-2、Bcl-2mRNA的表达（P<0.05），抑制促凋亡因子Bax、BaxmRNA的表达（P<0.05）；与教材方比较，肾上腺Bax，在球状带，网状带上均有统计学意义（P <0.05，P <0.01），在束状带上无统计学意义（P>0.05）；肾上腺皮质Bcl-2在网状带均有统计学意义（P均<0.05），在球状带上无统计学意义（P>0.05）；更年汤能使下降的下丘脑ER水平明显提高（p<0.05），但对ERmRNA影响不明显（p>0.05）；可改善模型大鼠骨密度情况（P<0.05）。结论：更年汤具有雌激素样作用，可激活因低雌激素水平失活的ER，促进ER蛋白合成，提高VEGF、VEGFmRNA、HSP70、HSP70mRNA、Bcl-2、Bcl-2mRNA的表达，抑制促凋亡因子Bax、BaxmRNA的表达，从而延缓子宫、卵巢、肾上腺的衰退，维持生殖内分泌环境的平衡，改善骨密度，起到治疗绝经综合征的作用。