间充质干细胞通过调节性B细胞治疗肝移植术后免疫介导胆道炎症损伤的细胞与分子机制研究

Nowadays, immune-mediated cholangitis is considered as refractory bile complication, which is one of the main course affecting long-term survival after liver transplantation. Recently, many studies have showed that in addition to cellular immunity, humoral immunity also played an important role in immune-mediated cholangitis.In previous clinical study, we proved that MSC played a therapeutic role in GVHD after bone marrow transplantation (81570161) and ischemia type biliary lesions after liver transplantation (NTC02223897) (Cell Mol Immunol，2015；Cytotherapy；2016). Furthermore, we showed that with the effects of MSC（Stem Cells Transl Med，2014，2014，Leukemia，2015), the ratio of Breg cells increased significantly, while T cells was unchanged in the patients with effective therapy. Above all, MSC maybe play an immunomodulatory effects in affecting the differentiation of B cells, especially Breg cells. However, the exact mechanisms are still unclear. Therefore, this study intends to explore the mechanisms of MSC in promoting immune-mediated cholangitis using a rat model of cholangitis after liver transplantation. In this setting, we aim to provide new mechanisms for immune-mediated cholangitis and a new theoretical basis for MSC in enhancing immune-mediated cholangitis after liver transplantation.

免疫介导胆道炎症损伤所致的难治性胆道并发症是目前影响肝移植患者中长期生存的的最主要原因。研究证实除细胞免疫外，体液免疫也发挥重要作用。课题组的两项临床研究证实:具有多免疫靶点调节作用的间充质干细胞（MSC）可有效治疗骨髓移植后移植物抗宿主病和肝移植术后缺血性胆管炎（NTC02223897，Cell Mol Immunol，2015；Cytotherapy，2016），有效的受者T细胞亚群变化不显著，而调节性B细胞（Breg）比例明显上升（Stem Cells Transl Med，2014；Leukemia，2015)，提示MSC影响B细胞外周分化，特别是Breg发挥免疫调节作用，但MSC如何调节B细胞分化从而改善胆道损伤的机制并不清楚。本课题利用肝移植胆管炎模型和临床研究，通过体内体外实验明确MSC通过Breg治疗肝移植术后胆道炎症损伤的机制，为MSC治疗难治性胆道并发症提供理论依据。

免疫介导胆道炎症损伤所致的难治性胆道并发症是目前影响肝移植患者中长期生存的的最主要原因。研究证实除细胞免疫外，体液免疫也发挥重要作用。课题组的两项临床研究证实:具有多免疫靶点调节作用的间充质干细胞（MSC）可有效治疗骨髓移植后移植物抗宿主病和肝移植术后缺血性胆管炎，有效的受者T细胞亚群变化不显著，而调节性B细胞（Breg）比例明显上升，提示MSC影响B细胞外周分化，特别是Breg发挥免疫调节作用，但MSC如何调节B细胞分化从而改善胆道损伤的机制并不清楚。本课题利用肝移植胆管炎模型和临床研究，通过体内体外实验明确MSC通过Breg治疗肝移植术后胆道炎症损伤的机制，为MSC治疗难治性胆道并发症提供理论依据。.本研究的主要目的为通过开展初期临床研究结合体内外实验研究MSCs是否通过发挥免疫调节功能在防治肝移植后免疫介导并发症发生发展中的作用及探究其中可能的机制，为进一步推广MSCs在肝移植领域的临床转化应用提供理论基础。首先在本课题的支持下开展MSCs在肝移植领域的I/IIa期、随机对照临床研究。通过收集ABO血型不符（ABO-incompatible, ABO-i）肝移植患者在术后分别给予美罗华或MSCs治疗，发现MSCs不但与美罗华相类似同样具有抗抗体介导的体液排斥反应，而且还可有效预防移植术后严重感染和胆道并发症的发生。此外，在体内研究中，通过构建大鼠肝移植急性排斥模型，发现MSCs可有效改善肝移植急性排斥反应，并发现免疫调节作用，抑制促炎因子以及供体来源特异性抗体（donor specific antibody, DSA）的水平，并上调抑炎因子的表达。进一步，通过分析肝脏组织内免疫细胞亚群，发现MSCs可调节肝脏局部B细胞和T细胞的功能以及免疫表型。机制上，我们发现MSCs发挥免疫调节作用减轻肝移植急性排斥反应主要是通过其分泌的胞外囊泡（MSC-derived extracellular vesicles, MSC-EVs）实现。并通过RNA-Seq及蛋白质谱等高通测序技术深入挖掘MSC-EVs发挥免疫调节作用的可能机制。.本项目实施期间，共发表21篇SCI论文，其中共同通讯作者15篇，影响因子大于10分3篇，影响因子大于5分6篇。