逆境胁迫法从金粟兰属植物组织中靶向发现倍半萜类酪氨酸酶抑制剂的研究

基于对植物体内二次代谢产物的抗逆境和防御机制的认识，本申请拟研究一种靶向发现天然酪氨酸酶抑制剂的新方法。本申请拟对金粟兰属两种药用植物天目金粟兰和银线草的愈伤组织进行逆境胁迫培养，活化植物组织中酪氨酸酶，从而激活植物体内抑制酪氨酸酶的二次代谢防御机制，探索从源头对活性物质进行引导合成。通过建立配体受体共孵育的手段和计算机模拟技术对与酪氨酸酶具有强结合活性的化合物进行识别。运用现代色谱和波谱技术对活性化合物，特别是微量的复杂倍半萜多聚体化合物进行分离分析，并且鉴定结构。进而采用酪氨酸酶多巴速率氧化法以及对体外培养的人体表皮黑色素细胞和鼠黑色素瘤B16细胞酪氨酸酶活性测定的方法筛选出强活性的化合物，为开发新一代酪氨酸酶抑制剂奠定基础。本课题将对天然活性物质的发现和分离模式同时进行创新性探讨。