养殖大黄鱼内生菌芽孢乳酸菌中抑菌先导化合物的发掘

Spoilage is an important factor in aquatic safety. Microorganisms (including Pseudomonas aeruginosa, Pseudomonas putrefaciens etc.) are threat to aquatic spoilage. Previous studies have shown that the secondary metabolites of Bacillus coagulans can significantly inhibit the growth of the microorganisms, But the material basis and mechanism is unclear. In view of this, combined with previous research, oriented by antibacterial activity, isolated compounds from the ethanol extract of Bacillus coagulans by different chromatographic methods such as column chromatography, MPLC and HPLC systems. Based on the data of UV, IR, NMR and MS, the structures of the compounds are identified, and obtain antibacterial lead compounds. meanwhile, using molecular biology techniques to elucidate its antibacterial mechanism. further modify and transform the lead compounds and get the compounds which have potential value of exploitation. the research results have important practical and theoretical value for researching and developing new preservative formulations which have independent intellectual property rights .

腐败变质是严重威胁水产品品质和安全的重要因素之一，包括假单胞菌、腐败希瓦氏菌等在内的腐败微生物是引起水产品腐败变质的关键。前期研究表明，芽孢乳酸菌通过分泌次生代谢产物显著抑制以上腐败菌的生长，但其物质基础和作用机制尚不明确。鉴于此，结合前期研究基础，拟以养殖大黄鱼内生菌芽孢乳酸菌为研究对象，分别采用固体和液体培养基对其进行逐步放大发酵；然后以乙醇为提取溶剂得到其粗提物；接着以经典的柱层析分离方法，给合现代分离手段如中压制备系统和HPLC半制备系统，并以抑菌活性为导向，从其粗提物中分离得到具有抑菌活性的次生代谢产物。运用各种光谱方法如核磁共振谱、质谱、红外和紫外光谱对这些化合物进行结构鉴定。得到抑菌活性显著的先导化合物，并利用分子生物学手段阐明其抑菌机制。对先导化合物进行结构修饰和改造，得到具有潜在开发价值的化合物。研究结果对研发具有自主知识产权的防腐保鲜制剂具有重要的现实意义和理论价值。

腐败变质是严重威胁水产品品质和安全的重要因素之一，包括大肠埃希菌、铜绿假单胞菌和腐败希瓦氏菌等在内的腐败微生物是引起水产品腐败变质的关键。前期研究表明，从养殖大黄鱼体内分离得到的芽孢乳酸菌（Bacillus coagulans）LL1103通过分泌次生代谢产物显著抑制以上腐败菌的生长，但其物质基础和作用机制尚不明确。鉴于此，结合前期研究基础，以养殖大黄鱼内生菌芽孢乳酸菌为研究对象，分别采用固体和液体培养基对其进行逐步放大发酵；然后以乙醇为提取溶剂得到其粗提物；接着以经典的柱层析分离方法，给合现代分离手段如中压制备系统和HPLC半制备系统，并以抑菌活性为导向，从其粗提物中分离得到14个化合物：环（4-羟基-脯氨酸-亮氨酸）、环（异亮氨酸-丙氨酸）、环（脯氨酸-缬氨酸）、环（脯氨酸-苯丙氨酸）、环（脯氨酸-亮氨酸）、环（甘氨酸-丙氨酸），环（脯氨酸-甘氨酸）、环（脯氨酸-丙氨酸）、环（甘氨酸-酪氨酸）、吡哆醇、胸腺嘧啶、三乙胺氢碘酸盐、2,3-丁二醇和月桂酸。9个为二酮哌嗪类化合物。其中3个化合物：环（脯氨酸-缬氨酸）、环（甘氨酸-丙氨酸）和环（甘氨酸-酪氨酸）对大肠埃希菌（Escherichia coli）具有显著抑制作用。具有潜在开发成为防腐保鲜剂的前景。研究结果对研发具有自主知识产权的防腐保鲜制剂具有重要的现实意义和理论价值。