p75NTR-mAChR偶联机制对黑素瘤细胞的调控作用研究

最新研究表明，低亲和性神经生长因子受体p75NTR（CD271）是肿瘤干细胞的新标志物，与黑素瘤密切相关，但是目前该分子对黑素瘤形态、生长方式以及生物学行为（增殖、粘附以及侵袭能力）等方面的影响和调节机制均不清楚。我们最近的工作表明，毒蕈碱型胆碱受体（mAChR）不但与黑素瘤细胞形态、生长方式以及细胞功能的动态变化密切相关，并且可能与p75NTR偶联进而调控黑素瘤的生物学特性。本项目将综合运用分子生物学、钙离子成像以及药理学干预等方法，从细胞和整体动物水平上首先对p75NTR-mAChR信号通路偶联进行确认，进而通过分析该偶联机制对黑素瘤形态、生长方式、生物学行为（增殖、粘附以及侵袭能力等）等方面的影响评价其病理意义。本项目的研究不但有利于揭示黑素瘤干细胞最新标志物p75NTR的重要生物学功能，而且将拓展当前关于p75NT偶联受体复合物的认识，为黑素瘤的治疗提供理论依据。

黑素瘤发病机制复杂，目前认为毒蕈碱型胆碱受体（mAChR）参与黑素瘤的发病过程，但是对于具体亚型（M1,M2,M3,M4,M5）的作用机制尚未明确。本项目研究了以下内容:（1）黑素瘤病理标本（表浅扩散阶段、结节性恶性增生阶段以及晚期淋巴结转移阶段）的分析；（2）培养不同生长阶段的黑素瘤细胞系，检测形态特征。结合病理标本提出黑素瘤可塑性的病理学和细胞学证据；（3）设计合成M3亚型siRNA，检测抑制效果。（4）运用M3亚型siRNA研究mAChR分子在黑素瘤增殖、侵袭、细胞形态可塑性中的作用；（5）初步证实M3亚型能与p75NTR之间偶联。本项目的研究为深入探索M3受体调控黑素瘤的分子机制奠定了基础。本项目已经发表论文1篇。