DGKα基因和OVA抗原复合壳聚糖纳米缓释疫苗靶向DC诱导哮喘免疫耐受的实验研究

免疫耐受机制缺陷是哮喘发病的重要机制。我们过去亦发现，诱导T细胞无能可诱导哮喘免疫耐受，能起到防治哮喘的作用。新近研究表现，甘油二酯激酶(DGK)α能分解T细胞胞膜上的甘油二酯(DAG)，中止或减弱T细胞胞膜的DAG信号，使RAS信号通路活化受抑，抑制T细胞活化，导致T细胞无能。DEC-205是树突状细胞(DC)高表达的膜受体。本研究拟制备表面吸附抗DEC-205抗体、包裹卵蛋白(OVA)抗原和DGKα表达质粒的复合壳聚糖纳米缓释疫苗(OVA-DGKα缓释复合疫苗)，该OVA-DGKα缓释复合疫苗能靶向作用于DC，并使DC在提呈OVA给T细胞的同时，表达DGKα分子，DGKα分子持续定位于T细胞胞膜上，分解其DAG，使T细胞受体(TCR)识别抗原被激活后所启动的DAG信号减弱或中止，持续诱导抗原特异性T细胞克隆无能，从而诱导抗原特异性免疫耐受，为哮喘的治疗提供新的方法。

免疫耐受机制缺陷是哮喘发病的重要机制。我们过去亦发现，诱导T细胞无能可诱导哮喘免疫耐受，能起到防治哮喘的作用。新近研究表现，甘油二酯激酶(DGK)α能分解T细胞胞膜上的甘油二酯(DAG)，中止或减弱T细胞胞膜的DAG信号，使RAS信号通路活化受抑，抑制T细胞活化，导致T细胞无能。DEC-205是树突状细胞(DC)高表达的膜受体。本研究成功制备表面吸附抗DEC-205抗体、包裹卵蛋白(OVA)抗原和DGKα表达质粒的靶向作用于DC的复合壳聚糖纳米缓释疫苗(OVA-DGKα缓释复合疫苗)，并证明OVA-DGKα缓释复合疫苗在体内能降低哮喘小鼠的气道炎症和气道高反应性，降低支气管肺泡灌洗液中Th2细胞因子水平，抑制Th2反应，降低OVA特异性IgE水平，有效抑制哮喘。在体外OVA-DGKα缓释复合疫苗能抑制T细胞增殖，抑制IL-2表达，抑制T细胞活化信号CD69表达，诱导抗原特异性免疫耐受。并通过动物实验证明，OVA-DGKα缓释复合疫苗注入体内是安全的，为哮喘的治疗提供新的方法。本课题共发表中文核心期刊2篇，申请国家发明专利3项，授权实用新型专利1项，目前已经向国外SCI杂志“VACCINE”投稿1篇。