氧化应激激活Wnt信号降低白癜风调节性T细胞功能的机制研究

Vitiligo is characterized by epidermal melanocytes loss due to regulatory cells(Tregs)-mediated over activation of cytotoxic T lymphocytes. Nevertheless, the mechanism for the impaired immune suppression function of vitiligo Treg cells and the reduced secretion of inhibitory molecules during oxidative stress are still unclear. Latest studies reveal that Wnt signaling has a key role for regulating the function of Treg cells and impaired Wnt signaling promotes the formation of vitiligo. Thus, we intend to use flow cytometry, Western Blot and immunofluorescence to analysis the expression and function of Wnt signaling in Treg cells in the blood and lesion of progressive vitiligo patients and to determine the relationship between Wnt signaling and disease activity. Moreover, we intend to demonstrate the role and underline mechanisms of Wnt signaling in the immune function of Treg cells. The results may add new insight to the pathogenesis of vitiligo and provide theoretical basis for the treatment.

氧化应激条件下，调节性T细胞（Treg）功能缺陷导致毒性杀伤性T细胞过度活化，是白癜风黑素细胞损伤的关键原因，但针对白癜风Treg细胞免疫抑制功能受损及抑制性分子分泌减弱等的原因尚不明确。研究表明，Wnt信号是调控Treg细胞功能的重要通路，我们前期研究初步证实白癜风Treg细胞中Wnt信号被激活。因此，本项目拟应用流式细胞术、白癜风小鼠模型、Western Blot和免疫荧光等技术，以进展期白癜风患者为研究对象，全面分析患者皮损周及外周血Treg细胞中Wnt信号的活化水平，明确Wnt信号与疾病活动性的关系；并通过干预Treg细胞中Wnt信号表达，阐明Wnt信号在白癜风免疫发病中的作用和具体分子机制，为治疗提供理论依据。

白癜风是一种常见的由表皮黑素细胞破坏导致的色素脱失性疾病，因其毁容性特征严重危害患者身心健康。氧化应激介导的细胞免疫功能紊乱是黑素细胞破坏的主要效应环节，但仍然缺乏针对氧化应激诱导 T 细胞免疫功能损伤的机制研究。研究表明，Wnt 信号不仅可直接影响黑素细胞的分化及白斑形成从而参与白癜风形成，也是调控 Treg 细胞免疫细胞生物学活动的关键通路,参与多种自身免疫性疾病的发病。. 本研究中，我们从细胞及分子学水平探究白癜风患者Treg细胞的功能及可能影响机制，发现相较于健康对照，进展期白癜风患者Treg细胞中Wnt、TCF1及IRF4等的表达升高；进一步探索Treg细胞的功能，发现抑制Wnt信号通路中Wnt表达可减弱Treg细胞抑制效应性T细胞的功能降低，且相关的抑制性细胞因子CTLA-4、TGF-β表达均降低；在此基础上，探究Wnt与Treg细胞功能的相关性，发现白癜风患者外周血及皮损周Wnt在Treg细胞中的表达均升高；通过Wnt抑制剂处理Treg细胞与CD8+T细胞孵育体系，发现Wnt降低可改善Treg细胞的增殖功能，并进一步研究发现Wnt激活下游分子TCF1、IRF4分子表达，减弱Treg细胞内IL-10的表达，从而减弱Treg细胞的抑制功能。综上所述，白癜风患者调Treg细胞Wnt信号活化，抑制其免疫调控功能，可能参与白癜风自身免疫紊乱的形成；下调或靶向Treg细胞中Wnt-TCF1-IRF4中关键分子表达可能改善Treg细胞的免疫抑制功能，发挥治疗白癜风的作用。