脂肪酸β氧化FATP-CPI通路在心肌缺血诱导脂代谢紊乱中的作用及活血化瘀中药的干预机制研究

Lipid infiltration theory believes that the disorder of lipid metabolism is important pathological mechanisms that lead to coronary heart disease (myocardial ischemia), but the early study on minitureswine with myaocardial ischemia of blood stasis syndrome based on 2D-MS, GC-MS -omics technology found that, without any lipid intervention, blood stasis syndrome model of myocardial ischemia appeared to the change of plasma ApoA-I, LDL, beta-hydroxybutyric acid and other lipid molecules as the main manifestation of lipid metabolism disorders. The project is planned with the application of animal model of myocardial ischemia with blood stasis syndrome, by using NMR, PCR combined with KEGG pathways analysis and bioinformatics methods to further confirm the overall changes of plasma lipid metabolism disorders, to investigate key pathological manchenism of the myocardial ischemia causing lipid metabolic disorders. Ischemia and lipid metabolism disorders relationship are researched by investigating cardiac fatty acid uptake and β-oxidation barriers especially FATP-CPI pathway as the main entry point, then after validated by the efficient Chinese herbal compound, to find out the intrinsic pathological mechanisms of ischemia causing lipid metabolism disorders and the mechanisms of promoting blood circulation therapy intervention. Our research is to clarify the of Coronary Heart disease with blood stasis syndrome,and discussing the intrinsic pathological mechanism of the prevention and treatment of Coronary Heart disease to further deepen our understanding of coronary heart disease pathogenesis. This will provide a new treatment strategy for other ischemia diseases.

脂质浸润学说认为，脂质代谢紊乱是导致冠心病心肌缺血的重要病理机制，但前期采用2D-MS、GC-MS等组学技术对单纯冠心病心肌缺血血瘀证小型猪进行蛋白组与代谢组学研究发现，没有任何脂质干预、单纯的心肌缺血血瘀证模型反而出现了以血浆ApoA-I、LDL、β-羟丁酸等脂类分子变化为主要表现的脂类代谢紊乱。本项目拟借助单纯的冠心病心肌缺血模型，采用NMR、PCR技术，结合KEGG通路分析等生物信息学方法，进一步确认血浆脂质代谢紊乱的整体变化情况，探讨单纯心肌缺血导致脂代谢紊乱的关键病理环节。以心脏对脂肪酸的吸收与β氧化障碍FATP-CPI通路为主要切入点，确有疗效的中药复方丹七片进行缺血与脂质代谢紊乱因果关系的再验证，寻找出单纯缺血引发脂代谢紊乱的内在病理机制以及活血化瘀中药的干预环节，提出新的冠心病预防与治疗的环节，进一步深化对冠心病发病机制的认识，同时为其他缺血性疾病的防治提供新的研究思路。

项目背景：.脂质浸润学说认为，脂质代谢紊乱是启动冠心病心肌缺血的重要病理机制，但前期采用2D-MS、GC-MS等技术对单纯冠心病心肌缺血血瘀证小型猪进行蛋白组学与代谢组学的研究发现，没有任何脂质干预的心肌缺血血瘀证模型反向引起了以ApoA-I、LDL、β-羟丁酸等主要表现的脂类代谢紊乱。其内在机制需要进一步阐释。.主要研究内容：.本项目借助冠心病心肌缺血动物模型，采用代谢组学结合生物信息学方法，以心脏对脂肪酸的吸收与氧化为切入点，探讨单纯心肌缺血导致脂代谢紊乱的关键病理通路。采用临床确有疗效的复方进行缺血程度与脂质代谢异常之间动态检测，对其因果关系进行再验证。.重要结果与关键数据：.课题建立了稳定的冠心病前降支结扎模型，以含有丹参三七的复方颗粒为主要干预药物，进行了药效评价与药理机制研究。结果显示：术后28 d，未用任何脂质干预的心肌缺血模型组与假手术组比较，射血分数EF值显著下降，且伴随血浆脂蛋白TC、TG、HDL、LDL变化，模型组大鼠TG含量显著增高。模型组大鼠LDL浓度和Apo-B水平显著上升，HDL和载脂蛋白ApoA-I表达显著下降。进一步研究发现，脂质转运蛋白FATP表达含量下降，肉碱脂酰转移酶CPT-I含量降低，模型组PPARα的水平较假手术组也出现明显下降。丹七组和阳性药组均能有效改善脂质代谢紊乱程度。它们可以有效降低模型组LDL和HMGCoA的含量，此外，丹七片还能够促进具有心肌保护作用HDL表达，提高载脂蛋白ApoA-I水平。Westernblot结果进一步显示，丹七片对FATP-CPT-I通路的激活具有正调控作用，同时能够上调模型组降低的PPARα与RXR的异二聚体水平（P<0.05），并抑制通路蛋白NR2C2的表达，进而达到改善脂质代谢紊乱的疗效。.综上，未给予任何脂质干预的心肌缺血模型出现了以外周血浆脂蛋白为主要表现的脂质代谢紊乱现象，其机制可能为心肌细胞对外周游离脂肪酸的转运（FATP-CPT-I）和PPARα-RXR障碍。丹七片可以激活FATP-CPT-I通路，抑制转录蛋白NR2C2介导PPARα-RXR水平的升高，提高心肌对脂肪酸的摄取与利用率。.科学意义：.本课题提出了新的冠心病血瘀证预防与治疗的干预环节。不仅对冠心病心肌缺血的发病机制有更进一步的认识，同时也为其他缺血性疾病包括脑缺血等的临床预防与治疗提供新的研究领域。