扶肾颗粒调节decorin基因表达靶向干扰腹膜胶原纤维稳定性抑制ECM的机制研究

Peritoneal fibrosis is a key factor of ultrafiltration failure of peritoneal dialysis, technical failure, effectively prevent peritoneal fibrosis of the long-term efficacy of peritoneal dialysis (PD) is of great significance.Peritoneal tissue extracellular matrix accumulation is peritoneal fibrosis initiation and reversible process, effective control of the peritoneal ECM can inhibit peritoneal fibrosis.The basic research confirmed that FuShenKeLi can invigorate the kidney by regulating TGF- beta inhibits EMT activation, prevent peritoneal fibrosis. Sequential study of this topic previous project of the National Natural Science Foundation, around "through regulation of decorin gene expression interferes with the stability of peritoneal tissue collagen fibers, thereby inhibiting ECM prevents the hypothesis of peritoneal fibrosis", used in the body and in vitro experiment, innovation by network pharmacology to analysis the effect and chemical constituents of FuShenKeLi , using Zymosan rat peritoneal fibrosis model combined with pathological science, molecular biology techniques, to investigate the effectiveness of FuShenKeLi intervention of peritoneal tissue ECM related pathway, provides the theoretical basis for traditional Chinese medicine in the prevention and treatment of peritoneal fibrosis.

腹膜纤维化是腹膜透析超滤衰竭、技术失败的关键因素，有效防止腹膜纤维化对腹透长期疗效具有重要意义。腹膜组织细胞外基质积聚是腹膜纤维化的始动和可逆环节，有效控制腹膜ECM可以抑制腹膜纤维化。前期基础研究证实扶肾颗粒可以通过调控TGF-β抑制EMT通路激活，防止腹膜纤维化。本课题系既往国家自然基金项目的序贯研究，围绕“通过调控decorin基因表达干扰腹膜组织胶原纤维稳定性，从而抑制ECM防止腹膜纤维化”的科学假说，采用在体与离体实验，创新性地通过网络药理学分析扶肾颗粒的有效成分及作用靶点预测，使用酵母多糖大鼠腹膜纤维化模型，结合病理学、分子生物学技术，探讨扶肾颗粒干预腹膜组织ECM相关作用通路的有效性，为中医药防治腹膜纤维化提供了理论依据。

腹膜纤维化是腹膜透析超滤衰竭、技术失败的关键因素，有效防止腹膜纤维化对腹透长期疗效具有重要意义。腹膜组织细胞外基质积聚是腹膜纤维化的始动和可逆环节，有效控制腹膜ECM可以抑制腹膜纤维化。本课题围绕“通过调控decorin基因表达干扰腹膜组织胶原纤维稳定性，从而抑制ECM防止腹膜纤维化”的科学假说展开研究，分别通过在体动物实验、离体细胞实验证实：高浓度葡萄糖透析液通过活化TGF-β刺激腹膜间皮细胞EMT，TGF-β首先与其受体TGF-ΒR1结合，进而促使受体磷酸化而激活，磷酸化的TGF-βR1持续磷酸化细胞内的信号转导分子Smad2/3在转化因子、激活因子与抑制因子的作用下促进血管活性物质释放、免疫抑制作用的发生及细胞凋亡。在细胞外基质中，TGF-β通过与Dcn结合参与细胞粘附信号转导，在这一过程中，扶肾颗粒调控Dcn的表达，通过旁分泌与自分泌的方式在ECM部位结合TGF-β，阻止TGF-β与其受体TGF-βR1相结合，从而抑制其下游信号通路TGF-β/Smad的激活，阻抑Smad2磷酸化，减少血管活性物质、激活因子及表达因子的释放。Dcn通过调整胶原纤维的C-末端，在胶原形成的起始阶段延迟胶原纤维的组建，使胶原数量减少，从而改善纤维化。通过高通量组学研究，我们发现ECM相互作用受体、蛋白消化与吸收、细胞分子黏附信号通路、核糖体反应相关通路、HIF-1信号通路、PI3K/Akt信号通路等均在一定程度上参与了腹膜纤维化进程，同时通过PPI蛋白相互作用分析，筛选出了ITGB3, IFG R1, GLUT1, PDK1等关键靶点蛋白。以上结果的发现，为腹膜纤维化发生发展机制提供了科学依据，均为扶肾颗粒抗纤维化提供了有效证据，为后续科研研究工作的开展提供了详实的理论基础。