精子66kDa蛋白cDNA基因的克隆和功能研究
基本信息
结项摘要
我们发现拟糖蛋白诱导精子顶体反应时,使获能过程中发生酪氨酸磷酸化的66kDa蛋白质酪氨酸去磷酸化。结果提示该蛋白质在顶体反应中起重要调节作用。提取并纯化小鼠精子66kDa蛋白质后，进行氨基酸序列分析,在GenBank中进行同源性分析,发现为一新蛋白质。为研究该蛋白质在顶体反应中的作用，我们拟进行下列研究:根据氨基酸序列设计简并引物，以睾丸mRNA为模板，进行RT-PCR。随机引物法标记PCR扩增产物，从睾丸cDNA文库中筛选出阳性克隆，测出66kDa蛋白质cDNA基因全序列。制备66kDa蛋白质多克隆抗体，用胶体金标记抗体的电镜技术检测该蛋白在精子中的定位情况。用酵母双杂交和免疫共沉淀实验筛选与该蛋白相互作用的蛋白质。检测66kDa蛋白基因是否在心脑肝肺肾肠等器官中表达。本项目对阐明精子顶体反应的机制具有重要意义。如果66kDa蛋白质只存在于精子中，则对发现新的避孕药物靶位点亦有重要意义
项目摘要
项目成果
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数据更新时间：2023-05-31
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