探索卵泡液中的奥秘：找寻多囊卵巢综合征病人卵泡液差异表达microRNAs并研究相关microRNAs及其靶基因的功能

多囊性卵巢综合征是一种最常见的育龄女性内分泌疾病，影响约6%-10%左右的育龄女性。MicroRNA是一类长度19-24个核苷酸左右的内源性非编码小分子单链RNA，已经被发现在多种癌症及内分泌代谢性疾病中起着至关重要的作用。人类卵泡液中究竟具有哪些种类的microRNAs，这些microRNAs与多囊卵巢综合征的发病有什么关系，这些问题国际国内均未见有任何研究报道。.本课题拟利用Solexa第2代深度测序技术从病人和正常人卵泡液中首先建立卵泡液中的microRNAs表达谱；对比疾病与正常microRNAs表达谱，找出差异表达的microRNAs；接着结合qRT-PCR进一步确定与疾病相关的microRNAs；最后以颗粒细胞（卵细胞周围附着，卵泡液为其提供生存微环境）为模型，研究相应microRNAs的功能及相应的靶基因。最终揭示出microRNAs在卵泡液中的作用及与多囊卵巢综合征的关系

在过去的三年中，我们紧密围绕着标书的主要内容：“探索卵泡液中的奥秘：找寻多囊卵巢综合征病人卵泡液差异表达microRNAs并研究相关microRNAs及其靶基因的功能”。严格按照课题书所计划的路线图，对人类卵泡液中的microRNAs进行了系统地研究。利用Hiseq2000深度测序，首次发现了在人类卵泡液中存在大量microRNAs，并发现这些microRNAs以微囊体的形式存在。生物信息学分析显示，其中有很多microRNAs与多个固醇类激素合成信号通路基因密切相关。在细胞水平上，发现高表达的microRNAs与多个激素合成及代谢通路相关。而后我们发现在PCOS病人卵泡液中，有一些microRNAs表达水平存在显著差异，并且这些差异microRNAs会显著影响激素的合成与代谢。. 文章最终发表于国际内分泌学权威杂志JCEM （IF=6.4）。由于此发现为首次在人类卵泡液中发现存在大量microRNAs，因此，文章发表后，得到了一系列杂志的引用。在此研究之前，并没有研究报告指出人类卵泡液中存在大量游离microRNAs，在本课题的资助下，我们成功验证了申请书中的假设。明确证明了，人类卵泡液中确实存在有microRNAs，并对其功能进行了相对深入的探索。卵泡液中游离microRNAs的发现为进一步以卵泡液为基础，研究卵子质量、预测胚胎发育潜能及研究女性生殖类相关疾病打下了基础。