耐盐碱中药二色补血草中抗肿瘤有效成分的积累及其资源品质评价

Desiccation and salt tolerant TCM Limonium bicolor (Plumbaginaceae) is used to cure cervical cancer and functional uterine bleeding etc. for its effect of enriching the blood, stopping bleeding, relieving fatigue, regulating menstruation, invigorating spleen and invigorating stomach. The objectives of this investigation were to tentatively confirm the antitumor spectrum by enlarging the screening scope, and ascertain the effective constituents with bioassay-directed separation, then based on the obtained active compounds, quantify the effective constituents of Limonium bicolor in different parts, different growth periods and different living conditions with UPLC-QTOF-HRMS or HPLC. More important is, the reasonable quality evaluation method established through comparing contents of the effective constituents in active parts. In our research, the antitumor constituents would be illuminated, and the effective parts, the best gathering time, the best living conditions of Limonium bicolor would be confirmed, according to the profile-effect relations, the reasonable quality evaluation method established. In accord to the result of our study, it is significant to stabilize the quality of Limonium bicolor and improve the rationality, security and validity of clinical treatment.

蓝雪科Plubaginaceae补血草属Limonium二色补血草Limonium bicolor为我国耐盐碱、耐干旱传统中药，具有补血、止血、散疲、调经、益脾、健胃之功效，可用于治疗宫颈癌和功能性子宫出血等症。本研究拟扩大二色补血草活性筛选的肿瘤细胞株范围，以确定其抗肿瘤谱；并以活性为导向，分离、鉴定其抗肿瘤有效物质；基于有效化学成分，用HPLC或UPLC-QTOF-HR-MSn对不同生长时期、不同生境、不同药用部位中的有效物质进行定量；根据有效部位，结合有效单体含量，建立具有谱-效对应关系的药材质量评价方法。通过本研究，将阐明二色补血草中抗肿瘤作用的有效物质、药材的抗肿瘤药用部位、药材最佳采集时间以及原植物最佳生境条件，并建立谱-效对应的、科学、合理的药材质量评价方法。这对稳定药材质量、提高临床用药的合理性、安全性、有效性具有重要意义。

二色补血草（Limonium bicolor (Bunge) O. Kuntze）是白花丹科（Plumbaginaceae）补血草属（Limoniun）多年生草本植物，耐盐碱、干旱，抗逆性强，文献报到具有抗肿瘤活性。从非盐碱二色补血草花和叶中中分离得到木犀草素，刺槐素，槲皮素，芦丁，山柰酚-3-O-α-L-鼠李糖苷，山柰酚，圣草酚山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷，槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷，山柰酚-3-O-β-D-(6''-O-没食子酰)-葡萄糖苷，槲皮素-3-O-β-D-半乳糖苷，槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷，异鼠李素，橙皮苷，杨梅素-3-O-α-L-鼠李糖苷；β-谷甾醇，β-胡萝卜苷，麦角甾-5-醇-3-烯，没食子酸乙酯对羟基苯甲酸乙酯，乙酰橙酰胺；从盐碱地的全草中分离得到杨梅素-3-O-α-L-鼠李糖苷、杨梅素-3-O-（6“-O-没食子酰）-β-D-半乳糖苷、山奈酚、山奈酚-3-O-α-L-鼠李糖苷、槲皮素、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷、槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷杨梅素-3-O-α-L-鼠李糖苷、杨梅素-3-O-（6“-O-没食子酰）-β-D-半乳糖苷、山奈酚、山奈酚-3-O-α-L-鼠李糖苷 、槲皮素、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷、槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷、异鼠李素、β-谷甾醇、β-胡萝卜苷。对不同生境采集的1-12月份二色补血草样品中的木犀草素、山奈酚、牡荆素、杨梅素、没食子酸、没食子酸乙酯、杨梅苷、槲皮素-3-O-葡萄糖苷、山奈酚-3-O-鼠李糖苷、杨梅素-3-O-半乳糖苷进行UPLC-Q-TOF-MS2定量分析。以COLO-205、U-2 OS、MCF-7、MDA-MB-231、 MGC-803、 Eca-109、Hela、 22RV1、PANC-1、Hep G2为模型，对二色补血草中单体化合物以及同产地不同时间、同时间不同部位的提取物进行抗肿瘤活性筛选，花部位提取物优于其他部位抗肿瘤效果，单体化合物以刺槐素最为广谱，对消化道肿瘤细胞的效果优于其他肿瘤细胞。从蛋白质水平、CHS基因的表达水平等证实二色补血草的耐盐机理是通过提高叶片盐腺数量、提高光合效率、增强抗氧化酶活性以及加速积累一些次生代谢物来抵御高盐环境。NaCl胁迫影响了二色补血草不同组织内黄酮和酚酸类化学成分含量的变化和其在重新分配，其中杨梅苷类化合物变化大。