基于TLR9-pDCs-CD4+CXCR3+T研究青蒿鳖甲药对配伍治疗SLE动脉粥样硬化的机制

In recent years, many studies have shown that SLE patients with cardiovascular disease incidence and mortality were higher than the general population. In addition to the traditional factors, the occurrence of AS in patients with SLE and inflammatory response, lipid metabolism and other factors are closely related. Recently, it has been reported in the literature that secretion of IFN-α by pDCs induced by TLR9 is an important mechanism for accelerating the development of SLE AS by stimulating the proliferation of CD4 + CXCR3 + T and its ligands in EC and mobilizing CD4 + CXCR3 + T to the arterial wall. Our team found that LCD could reduce the secretion of IFN-α by pDCs by inhibiting TLR9. Qinghao-Biejia Herb Pair is a key group of LCD, and we found that Qinghao-Biejia Herb Pair has therapeutic effect on AS of SLE, Artemisinin, a major blood component of Qinghao-Biejia Herb Pair, can inhibit the proliferation of CD4 + T cells in SLE. In summary, we intend to start from the main line of TLR9-pDCs-CD4 + CXCR3 + T to identify the effects of Qinghao-Biejia Herb Pair on SLE combined AS; using Shotgun lipidomics technology to explore effect of Qinghao-Biejia Herb Pair on lipid metabolism disorder, a core factor in AS. The results can provide a new scientific basis for the prevention and treatment of SLE combined AS by traditional Chinese medicine.

近年来很多研究证明SLE患者的心血管疾病发生率及死亡率均高于普通人群。除传统因素外，SLE患者AS的发生与炎症反应、脂质代谢障碍等因素有密切关系。近来文献报道TLR9刺激pDCs分泌IFN-α，引起CD4+CXCR3+T及其配体在EC的增殖并迁移CD4+CXCR3+T募集到动脉壁是加速SLE合并AS发展的重要机制。本团队前期研究发现狼疮定可通过抑制TLR9减少pDCs分泌IFN-α，青蒿-鳖甲是其核心药对，我们检测发现青蒿鳖甲药对对狼疮鼠AS有治疗效果，其入血主要成分青蒿素等及其衍生物可以抑制SLE体内CD4+T细胞增殖。综上所述，我们拟从TLR9-pDCs-CD4+CXCR3+T这条主线出发，明确青蒿鳖甲药对配伍治疗SLE伴AS的作用机制；利用Shotgun脂质组学技术探讨青蒿鳖甲药对配伍对引起AS的核心因素脂质代谢障碍的影响。研究结果可以为中医药靶向防治SLE伴AS提供新的科学依据。

SLE作为一种自身免疫病，在全身多个系统都易累及病变，其以免疫性炎症为突出表现。近几年来不断有报道表明SLE患者合并AS相关疾病的概率为正常人群的数倍，在各个阶段的人群中常常表现出重要脏器血管病变。. 临床患者TLR7或TLR9/MyD88信号通路的激活以及产生的IFN-α会催化SLE疾病进展。而IFN-α是动脉粥样硬化中血管的标志性细胞因子，其作为内源性配体，诱导的IFN-α的产生可通过干预内皮祖细胞的生成来加速AS，刺激小鼠巨噬细胞以NF-κB和IRF7依赖性方式转化为泡沫细胞。因此TLR9/MyD88信号通路在SLE及AS的发生发展过程中都扮演着重要的角色。青蒿鳖甲汤对治疗SLE有显著成效，青蒿鳖甲药对是其核心成分，具有解毒祛瘀、滋阴补肾功效的中药药对，两药相互增效、引药归经。但目前国内外有关青蒿鳖甲配伍是否能调节免疫反应同时缓解AS病变，以及如何调节SLE和AS的机制研究较少。为此本研究应用ApoE-/-小鼠腹腔注射降植烷建立SLE并发AS模型，评价了药对、青蒿、鳖甲以及羟氯喹对SLE并发AS的作用。. 本研究发现与模型组相比，QB组小鼠体重相对稳定，小鼠脾脏肿胀减轻，血清dsDNA与ANA含量明显降低，尿蛋白含量也明显减少。肾脏HE与补体C3免疫组化染色都显示药对治疗可以对肾脏有一定的保护作用。检测肾脏与主动脉TLR9/MyD88的mRNA表达水平发现，QB组小鼠的表达较表达升高的模型组均显著降低；进而检测了血清、肾脏及肝脏中炎症因子的表达，发现药对干预后可降低促炎炎症因子表达，上调抑炎炎症因子的表达。此外，本研究发现QB组小鼠的血清CHOL与LDL含量的降低最为显著，在肝脏中亦有此趋势。来自主动脉的AS指标检测结果发现，与模型组相比，QB组小鼠主动脉根部的HE与EVG染色均显示斑块沉积有明显的减少、其中膜弹力纤维较为完整。. 青蒿鳖甲药对对SLE合并AS的改善作用是多靶点的，不仅降低血脂水平，调节脂质代谢，降低炎症反应从而减少斑块的沉积，对TLR9/MyD88通路的抑制更改善了狼疮疾病病情及炎性激活，且配伍作用效果优于单个药物。当然，该研究结果目前局限于动物实验，还有待进一步的临床研究。