基于肠道转运机制的白芷药对配伍原理研究

结合白芷历代文献论述和初步实验结果，提出"白芷药对配伍应用产生相成治疗作用，不仅表现为不同活性成分作用于机体的不同靶点，还表现为白芷活性成分促进其配伍'对药'活性成分肠道转运"的假说，并从调节细胞膜流动性、细胞间紧密连接、外排转运蛋白、肠上皮细胞内代谢酶活性等药物转运吸收阻力角度，综合运用生物药剂学和分子细胞生物学研究方法，研究白芷配伍"对药"活性成分的肠道转运机理和白芷促吸机理，从而使白芷药对配伍原理和白芷"引药入血"的作用本质得到阐明；同时，结合吸收毒性评价，探索白芷活性成分作为吸收促进剂的潜能。本项目从肠道转运角度研究白芷药对配伍原理和"引药入血"作用本质，可为中药配伍理论研究提供新思路，为引药研究提供示范；在中医药理论指导下寻找吸收促进剂，可为吸收促进剂的寻找提供新思路。本项目研究结果也将为白芷活性成分开发成新型辅料- - 吸收促进剂奠定基础；为白芷配伍组方，提高原方疗效提供理论依据。

采用外翻肠囊、在体单向肠灌流及Caco-2细胞三种模型，从离体、在体及细胞水平研究了白芷对配伍对药活性成分肠道转运的影响。研究结果表明白芷可以促进配伍“对药”葛根和黄芩活性成分葛根素和黄芩苷等难渗透性成分的肠道转运；对元胡和川芎的活性成分延胡索乙素和阿魏酸等易吸收成分的肠道转运分别有一定程度的抑制和促进作用；而对甘草活性成分甘草酸和甘草苷的肠道转运表现为明显的抑制作用。结果证实了白芷药对配伍应用产生相成治疗作用，不仅表现为不同活性成分作用于机体的不同靶点，还表现为白芷活性成分促进其配伍‘对药’活性成分肠道转运。. 采用在体单向肠灌流和Caco-2细胞两种模型，研究了pH、浓度、转运方向、紧密连接开放剂以及外排转运蛋白对药物肠道转运的影响。结果表明葛根、黄芩和川芎活性成分除有一定程度的被动转运外，均有主动转运参与；MRP蛋白可能是葛根素、阿魏酸、黄芩苷的底物；而p-gp则可能仅是葛根素和阿魏酸的底物。通过上述研究初步阐明了白芷配伍药对活性成分的吸收机理。. 采用Caco-2细胞模型，从细胞膜流动性、细胞间紧密连接、外排转运蛋白等角度研究了白芷对药物转运吸收阻力的易化作用。研究结果表明：白芷对细胞膜的流动性影响不明显；对细胞间紧密连接相关蛋白和p-gp的表达及p-gp的功能具有抑制作用。因而白芷易化了药物的转运吸收阻力，从而初步阐明了白芷促进其配伍对药吸收的机理，使白芷药对配伍原理和白芷“引药入血”的作用本质从肠道转运角度得到阐明。. 采用外翻肠囊和Caco-2细胞两种模型，研究了白芷活性成分的毒性，结果表明在吸收促进的药物浓度范围内，白芷对细胞的存活和黏膜上皮的组织结构无明显毒性；对细胞间的紧密连接有一定开放作用，但去除药物后，细胞间的紧密连接有一定程度的恢复，表明白芷作为吸收促进剂的使用较安全。结合其对配伍对药有吸收促进作用的研究结果，表明白芷活性成分具有作为吸收促进剂的潜能。. 总之：课题从肠道转运角度研究了白芷药对配伍原理和“引药入血”的作用本质，可为中药配伍理论研究提供新思路，为引药研究提供示范；在中医药理论指导下寻找吸收促进剂，可为吸收促进剂的寻找提供新思路。本课题的研究结果也将为白芷活性成分开发成新型辅料——吸收促进剂奠定基础；为白芷配伍组方，提高原方疗效提供理论依据。