血管内皮生长抑制因子对肾透明细胞癌微血管形成和肿瘤生长的影响

针对目前肾细胞癌治疗以根治性手术为主，术后复发率高，放、化疗效果不佳，现有靶向治疗在抑制肿瘤微血管生成一段时间后，其它微血管生成通路继发激活，致疗效不佳，迫切需要更有效治疗手段的现状，根据血管内皮生长抑制因子（VEGI）在死亡受体3（DR3）存在的情况下可能诱导血管内皮细胞凋亡、以及我们前期试验中发现VEGI可以抑制一些肿瘤细胞活性的现象，推测提高VEGI表达可能会抑制肾细胞癌的生长。为此，我们准备以BALBc nu/nu 裸鼠、肾透明细胞癌细胞系、肾细胞癌和配对正常肾脏组织为试验对象，应用动物试验、细胞功能实验和Western Blot等方法，检测VEGI与DR3在蛋白和基因水平的关系、VEGI与肾细胞癌微血管密度和肾细胞癌恶性程度的关系，分析VEGI对肾细胞癌微血管以及肿瘤生长的影响，为阐明VEGI在肾细胞癌发生、发展中的作用、进一步研究新型的肾细胞癌微血管生成抑制治疗方法提供线索

在该项研究中，我们以BALBcnu/nu 裸鼠、肾透明细胞癌细胞系、肾细胞癌和配对正常肾脏组织为试验对象，应用动物试验、细胞功能实验，RT-PCR， Q-PCR和Western Blot 等方法，检测了VEGI 174及其异构体在蛋白和基因水平的表达、VEGI174与肾细胞癌微血管密度和肾细胞癌恶性程度的关系，分析了VEGI 对肾细胞癌微血管以及肿瘤生长的影响，为阐明VEGI 在肾细胞癌发生、发展中的作用、进一步研究新型的肾细胞癌微血管生成抑制治疗方法提供线索。.首先，通过肾透明细胞癌组织标本，明确了肾透明细胞癌组织中血管内皮生长抑制因子在基因和蛋白水平均低于正常肾脏组织，并且VEGI蛋白表达的阳性率与肾透明细胞癌的病理分级呈负相关关系，但是VEGI表达水平的变化与肾癌组织中微血管密度和患者的预后无关。其次，通过对肾透明细胞癌组织标本的检测，我们发现VEGI174、VEGI 192和VEGI 251这三种异构体在肾透明细胞癌和正常肾脏组织中均存在表达，但仅VEGI 174和VEGI192在肾透明细胞癌组织中的表达显著低于正常肾脏组织，VEGI251在正常肾组织和肾透明细胞癌组织中的表达无显著性差异，提示VEGI174和VEGI192可能是肾透明细胞癌发生的负向调节因子。再次，在细胞水平，研究发现VEGI过表达对肾透明细胞癌细胞~786-0细胞生长、细胞凋亡、细胞浸润等功能无影响，但是过表达VEGI可以抑制786-0细胞的运动和粘附能力。此外，将过表达VEGI的肾透明细胞癌细胞与血管内皮细胞共同培养，可以发现过表达VEGI后可以抑制血管内皮细胞的聚集、管化。提示过表达VEGI可能对肾透明细胞癌细胞的微血管形成起到抑制作用。最后，动物实验表明过表达全长VEGI174可以抑制肾透明细胞癌细胞在裸鼠体内的生长。而这种抑制肿瘤在动物体内生长的能力可能是来自于其抗肿瘤微血管形成的能力，而不是来源于其直接对肿瘤细胞的作用。这提示VEGI可能在肾细胞癌的发生、发展中起着负向调节作用。.综上所述，在该项研究中，我们基本按照原有的年度计划，圆满完成了试验设计的目标，获得了阶段性的成果。已经发表SCI文章三篇，核心期刊文章一篇；联合兄弟单位申报并成功获得了教育部科学进步二等奖（第二完成人）；成功培养博士研究生2人（在读1名），硕士研究生2人（在读1名）；圆满完成了研究任务。