肾微血管内皮细胞转分化在移植肾间质纤维化形成中的作用及肝细胞生长因子干预研究

肌成纤维细胞聚集作为移植肾间质纤维化的决定性因素，其来源及激活机制已成为当今学者瞻目的研究热点。既往研究表明肝细胞生长因子（HGF）可拮抗移植肾间质纤维化形成，但分子机制不明。内皮细胞-间质细胞转分化（EndMT）近来被证实可引起多种组织纤维化形成，且申请人近期研究发现EndMT现象存在于失功能的移植肾组织中，提示肾微血管EndMT可能是移植肾间质纤维化形成中肌成纤维细胞的重要来源。故而，本课题拟采用同种异体肾移植大鼠模型和基因转染等技术，深入探讨肾微血管EndMT在移植肾间质纤维化形成中的作用及相关机制。并在此基础上，进一步探究HGF对肾微血管EndMT和移植肾间质纤维化形成的影响及相关机制。本课题成果不仅有助于从分子水平深入认识移植肾间质纤维化形成的机制、扩展对HGF拮抗移植肾间质纤维化形成机制的理解，而且为从EndMT角度防治移植肾间质纤维化提供新线索和靶标。

移植肾间质纤维化是引起慢性移植肾失功进而影响移植肾预后的关键因素，而肌成纤维细胞聚集作为移植肾间质纤维化的决定性因素，其来源及激活机制至今未明且已成为当今学者瞻目的研究热点。本项目从内皮细胞-间质细胞转分化（ endothelial to mesenchymal transition，EndMT）现象入手，运用基因转染等技术，并通过蛋白免疫印迹、实时定量RT-PCR等方法，从慢性移植肾失功患者、同种异体肾移植大鼠模型及人脐静脉内皮细胞三个水平，深入探讨肾微血管EndMT在移植肾间质纤维化形成中的作用及相关机制，并在此基础上进一步探讨肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor，HGF）在其中的影响。本研究首次在人与大鼠动物模型中证实肾微血管EndMT存在于移植肾间质纤维化形成过程中，并与移植肾间质纤维化形成密切相关；并证实TGF-beta1可通过介导Akt信号传导通路的活化进而诱导EndMT的形成。此外，本研究还首次在同种异体肾移植大鼠模型中证实了HGF可通过抑制TGF-beta1表达及肾微血管EndMT现象进而延缓甚至逆转移植肾间质纤维化形成，并指出HGF的该作用与其抑制细胞内Akt信号传导通路的活性相关。本项目的研究结果不仅有助于从分子水平深入认识移植肾间质纤维化的形成机制、扩展对HGF拮抗移植肾间质纤维化形成机制的理解，而且首次提出可以从阻止EndMT形成的角度设计并开发防治移植肾间质纤维化进展的新措施。