猪正常肉与PSE肉差异蛋白质组学研究

Pork production has been growing steadily worldwide over the past few decades. This increase is primarily due to a shift in consumers'taste preferences.Skeletal muscle represents the most abundant tissue in the adult mammalian body and plays a central role in motility and the control of whole-body metabolism. PSE meat is a sort of pale,soft,exudative meat.It is commonly used to make re-composed meat products in many countries in the world because of its poor sensory properties,and it is believed as unfitted for sale as fresh meat.When PSE meat is processed to be re-composed products. In this study, the platform for porcine skeletal muscle proteomics research was established using two-dimensional electrophoresis (2-DE) and mass spectrometry (MS).The skeletal muscle proteome of PSE meat and normal meat was analyzed. Screening and molecular biological analysis of differentially expressed proteins were carried. The aim is to understand the molecular mechanism of meat quality formation.

随着社会的进步，人们生活条件的改善，肉类产品成为人体所需能量及各种营养素供应的主要来源，猪肉是肉类消费的重要组成部分，是人类获得蛋白质营养物质的主要途径之一，在国人饮食结构中占据绝对的比重。PSE肉（苍白、柔软、汁液渗出肉）是猪肉生产中常见的质量缺陷，PSE肉的感官品质较差、不适宜于鲜销，世界各国多将其用于重组肉制品的加工。由于PSE肉每年都会给世界各国带来难以估量的经济损失，因此对如何减少PSE肉的产生成为了全世界肉类工业最主要关心的问题。本研究通过建立的以双向电泳和质谱为基础的蛋白质组学分析平台，开展猪肌肉组织蛋白质组学相关研究，系统分析了猪PSE肉与正常肉的蛋白质组学差异，并就部分差异蛋白在基因水平做了进一步的研究，以期为阐明猪肌肉品质形成的分子机制奠定了分子基础和提供较好的理论借鉴参考。

PSE肉的感官品质较差、不适宜于鲜销，世界各国多将其用于重组肉制品的加工。由于PSE肉每年都会给世界各国带来难以估量的经济损失，因此对如何减少PSE肉的产生成为了全世界肉类工业最主要关心的问题。. 本课题组通过iTRAQ技术为基础的蛋白质组学分析平台，开展猪肌肉组织蛋白质组学相关研究，系统分析了猪PSE肉与正常肉的蛋白质组学差异，并就部分差异蛋白在基因水平做了进一步的研究。结果表明：以猪背最长肌为研究对象，采用同位素标记相对和绝对定量（iTRAQ）技术对宰后不同品种和同一品种(正常肉和PSE肉)猪肉进行差异蛋白质组学分析，探讨正常肉和PSE肉蛋白质的变化规律。iTRAQ试验共鉴定1557种蛋白质，GO生物过程注释表明参与细胞过程和代谢过程蛋白所占比例最多；细胞成分注释表明蛋白数量最多的为细胞和细胞成分相关蛋白。分子功能注释以结合功能和催化功能相关蛋白为主。COG注释表明鉴定到的蛋白质数量最多的cluster为代谢功能(278个蛋白)。Pathway代谢通路注释表明共有1471条蛋白注释到291个代谢通路中，注释到新陈代谢通路的蛋白最多。我们采用Western Blot和q-PCR方法，选取4个蛋白进行验证分析，发现结果与蛋白质组学数据较一致，说明了iTRAQ结果的可靠性。. MyHC家族基因的差异表达结果显示：正常肉中大蒲莲猪MyHCIIa mRNA表达量极显著高于大白猪（P<0.01），大白猪MyHCIIb mRNA表达量极显著高于大蒲莲猪（P<0.01），大蒲莲猪MyHCIIx mRNA表达量显著高于大白猪（P<0.05）。PSE肉中大蒲莲猪和大白猪差异没有变化，但是PSE中的MyHC IIb和MyHC IIx表达量上升。. 采用PCR-SSCP技术对4个候选SNP位点进行分型，在大群体中分析候选SNP位点与失水率的相关。结果表明，COL6A1基因SNP位点2种基因型之间失水率无显著差异(P>0.05)； FBN2和ITGA-9基因SNP位点两种纯合子间失水率差异显著，其中FBN2基因DD型失水率显著低于CC型(p<0.05 )；ITGA-9基因FF型失水率显著低于EE型失水率(p<0.05 )。以上结果为进一步开展猪肌肉品质研究提供理论依据。