维、汉IL-4和IFN-Υ基因甲基化差异对Th1/Th2因子调控和对移植肾影响的比较研究

维吾尔族HLA与汉族不同，两者体内的Th1/Th2细胞因子DNA甲基化差异对肾移植的影响未见报道。已发现维族肾移植患者急性排斥率高于汉族,急排和非急排患者间存在Th1/Th2因子有遗传差异，表观遗传研究有助于阐明上述问题。项目以前瞻队列方式，用PCR-RFLP法检测移植前维、汉患者IFN-ΥIL-4基因多态性,用MSP检测IFN-ΥIL-4基因甲基化状态，用ABC-ELISA法和流式细胞技术检测移植前、移植后1周和4周的Th1（IFN-γ和IL-2）和Th2因子（IL-4和IL-10）以及5个T细胞亚群。通过比对维、汉间IFN-γ和IL-4基因型和DNA甲基化的差异，分析差异对Th1/Th2因子表达和对T细胞亚群分布的影响，串联其对移植肾的影响，可从表观遗传层面阐述维汉民族间基因编码和基因表达差异对临床移植的影响和可能的机制，形成基因型-基因表达型-分子生物指标-相关临床事件的整体研究模式

本项目经医院伦理委员会审核同意后自2012年启动，至2015年底完成了53例肾移植患者体内的IL-4和IFN-γ基因多态性、IL-4和IFN-γDNA甲基化的检测，以及4个T细胞亚群（CD4+、CD8+、 CD4+CD25+FOXP3+、 CD8+CD28+）和IL-2、IL-4、IL-10和IFN-γ细胞因子的动态检测和数据的分析。我们发现肾移植患者体内IFN-γ和IL-4DNA甲基化程度与血清IFN-γ和IL-4水平呈负相关，DNA甲基化程度可影响肾移植的预后，维、汉民族间甲基化存在差异（IL-4），不同基因型间未见甲基化差异。结果显示肾移植患者术后4周体内IFN-γ和IL-4 DNA高甲基化组发生重症感染、CKD和死亡事件明显高于低甲基化组；低甲基化呈现出Treg细胞下降易发生急排的趋势。借助本项目我们建立了可应用于临床的IFN-γ和IL-4DNA甲基化检测的方法学和流程，为后续研究奠定了基础。在本项目研究的基础上获得肾移植甲基化后续国基金项目1项，培养博士生1人，硕士生1人。项目实施期间受国家肾移植供肾政策影响，入组样本量低于预期，影响论文的撰写，项目经费按预算要求运行。