基于TGF-β1/Smads和ERK通路cross-talk的中药复方新风胶囊改善佐剂关节炎大鼠肺功能的机制研究

类风湿关节炎（RA）肺部病变起病隐匿、病情快、病死率高，而肺功能改变早于呼吸系统临床表现及肺部影像学改变。根据中医肺脾气虚病机，结合前期研究基础和RA"从脾论治"原则，本课题组提出健脾化湿通络法通过调控TGF-β1/Smads和ERK信号通路"串话"（cross-talk）改善RA患者肺功能的假说。为验证这一假说，本项目将建立佐剂关节炎（AA）大鼠模型，系统观察AA大鼠肺功能、细胞因子、TGF-β1/Smads和ERK信号通路的变化特征及健脾化湿通络中药新风胶囊（XFC）对其影响，通过分析TGF-β1介导的Smads和ERK1/2通路cross-talk,阐明AA大鼠肺功能变化的机制，研究XFC对AA大鼠肺功能的作用环节。该研究将深化"肺脾同治、整体调节"的科学内涵,为中医药防治RA肺功能降低提供分子生物学的研究依据。

研究背景：类风湿关节炎（RA）肺部病变起病隐匿、病情进展快、病死率高。RA肺功能变化涉及细胞、细胞因子及细胞外基质(ECM)等因素间的相互作用,是由不同的信号传递通路通过相互联系和作用而形成的,不同的信号转导通路间存在着信息交互作用(cross-talk)。深入研究TGF-β1/Smads与ERK信号传递通路之间的cross-talk意义重大。RA肺病变的治疗西医长期用药副反应增多。而采用健脾化湿通络中药复方新风胶囊对于RA肺功能的改善效果显著。.研究内容：本研究观察AA大鼠关节和肺的形态学、肺功能、血清细胞因子、滑膜、肺组织TGF-β1/Smads、ERK 通路变化：采用免疫组化、RT-PCR、Western Blotting检测各组大鼠滑膜、肺组织Smad、ERK通路表达。.研究结果：（1） XFC能明显抑制AA大鼠关节炎症反应：XFC能降低AA大鼠足趾肿胀度和AI，减少炎细胞对关节滑膜的浸润，减轻局部充血和肿胀，抑制血管翳的形成，改善关节功能。（2）XFC能明显改善AA大鼠肺功能水平：XFC通过提高肺功能参数FEV1、FEF50、FEF75、MMF、PEF表达，改善AA大鼠肺部通气功能和小气道功能，增强肺部气体交换率，提高肺功能水平。（3） XFC能明显提高AA大鼠体质量：XFC通过健脾益气、化湿通络的功效，能明显提高AA大鼠食欲及饮水量，增加体质量水平，改善全身症状和机能活动。（4）XFC能明显调节AA大鼠肺组织形态学：XFC能减轻炎性细胞浸润程度，通过抑制炎性介质对肺组织的刺激，降低AA大鼠肺间质纤维化程度，维持Ⅱ型肺泡细胞细胞器的功能和形态。（5）XFC可调节AA大鼠细胞因子平衡提高肺功能：XFC可上调IL-10、IFN-γ、FGF表达，下调IL-1β、IL-4、TGF-β1、CTGF表达。（6） XFC可提高Smad7表达，抑制p-Smad2/3与Smad4的结合及阻止Smad2/3磷酸化。（7） XFC可抑制ERK1/2磷酸化过程，阻止信号通路的激活。（8）XFC可调节AA大鼠Smads和ERK通路cross-talk，降低信号传导与DNA的转录活动。.研究意义：本项目意义不仅丰富和完善中医药治疗RA肺功能降低的理论,还能在中医药治疗RA肺功能降低研究领域产生重大的理论突破,开辟一条适合中医药治疗RA肺功能降低的新途径。