hsBAFF上调胞内钙离子激活B淋巴细胞的信号转导网络免疫调控机理研究

BAFF在B淋巴细胞激活以及自身免疫性疾病发生中起着至关重要的作用。本课题组前期工作发现hsBAFF上调胞内钙离子连接着ERK信号激活促进B细胞活化，观察到hsBAFF通过激活mTOR通路调节B细胞增殖。本项目拟通过体外实验，综合研究hsBAFF上调B淋巴细胞胞内Ca2+来源及其分别与CaM、CaMKII信号变化、PP2A活性表现以及ERK和mTOR通路激活的关系，解析mTOR复合物TORC1和TORC2中关键信号分子Raptor和Rictor以及其介导的下游效应分子在上调或下调后，hsBAFF激活B淋巴细胞表现，探明hsBAFF诱发B细胞活化与相关信号分子的因果关系及其上调或激活的可能分子机理。并采用体内实验，进一步论证和确认hsBAFF通过调节B淋巴细胞Ca2+、ERK和mTOR信号转导网络的变化和相互作用激活B淋巴细胞提高机体免疫反应的机理，为相关疾病的治疗提供科学依据和指导。

BAFF在B淋巴细胞激活以及自身免疫性疾病发生中起着至关重要的作用。本课题组前期工作发现hsBAFF上调胞内游离钙离子（Ca2+）连接着Erk1/2信号激活促进B淋巴细胞活化，观察到hsBAFF通过激活mTOR通路调节B淋巴细胞增殖，但其分子机理有待深入研究。本研究通过离体和在体hsBAFF处理实验模型，综合研究了hsBAFF上调B淋巴细胞胞内游离Ca2+来源及其分别与CaMKII信号变化、PP2A活性表现以及Erk1/2和mTOR通路激活的关系；深入解析了hsBAFF诱发正常B淋巴细胞和B淋巴瘤细胞增殖和生存分别与mTOR复合物TORC1和TORC2中关键信号分子Raptor和Rictor以及其介导的下游效应分子S6K1、4E-BP1、Akt的因果关系及其上调或下调的可能分子机理。其中每个环节包含了探讨雷帕霉素通过调控Ca2+-CaMKII、mTORC1/2和/或PP2A-Erk1/2信号转导抑制hsBAFF刺激正常B淋巴细胞和B淋巴瘤细胞增殖和生存分子机理。结果显示：hsBAFF诱导胞外Ca2+内流和内质网Ca2+释放升高胞内游离Ca2+水平介导CaMKII磷酸化，籍此激活mTOR通路促进B淋巴细胞增殖和生存；hsBAFF部分地通过Ca2+-CaMKII依赖地抑制PP2A激活Erk1/2促进正常B淋巴细胞和B淋巴瘤细胞增殖和生存；hsBAFF通过PTEN/Akt-Erk1/2信号转导促进B细胞增殖和生存。研究发现，雷帕霉素通过调控Ca2+-CaMKII和mTORC1/2信号转导抑制hsBAFF促进正常B淋巴细胞和B淋巴瘤细胞增殖和生存。研究确认，雷帕霉素通过靶向阻滞mTOR介导PP2A-Erk1/2信号通路抑制hsBAFF刺激正常B淋巴细胞和B淋巴瘤细胞的增殖和生存。我们注意到，多细胞因子通过Erk1/2和S6K1通路在调控hsBAFF依赖的B细胞增殖和生存中的作用。在体实验显示，hsBAFF通过Ca2+-CaMKII信号转导激活mTOR通路在促进B淋巴细胞增殖和生存中的作用。我们的结果强烈地提示：mTOR、CaMKII和Erk1/2抑制剂、PP2A激活剂或操纵胞内Ca2+水平可以为阻止BAFF诱导正常B淋巴细胞和B淋巴瘤细胞以及自身免疫性疾病开发利用。