Foxp3基因抑制上皮性卵巢癌恶性生物学特性的分子机制及其临床意义研究

Foxp3基因不仅是调节性T细胞生长发育和发挥免疫抑制功能的关键因子；最近研究显示Foxp3基因在乳腺癌中表达显著下降，推测其可能为一新的肿瘤抑制基因。申请人首次证实Foxp3基因在上皮性卵巢癌中表达显著下降，并且在上皮性卵巢癌SKOV3细胞中发挥肿瘤抑制功能，但具体的调控机制不清楚。本课题拟在临床标本中研究Foxp3分子与人上皮性卵巢癌的恶性生物学特征的关系，揭示Foxp3基因与人上皮性卵巢癌预后的关系；在上皮性卵巢癌细胞株中研究Foxp3基因肿瘤抑制功能的分子机制，是否与乳腺癌相似；研究肿瘤细胞中Foxp3分子表达水平与其分泌的细胞因子的关系，揭示Foxp3基因的分子免疫机制；在裸鼠卵巢癌模型上验证Foxp3基因上调表达是否抑制上皮性卵巢癌细胞的恶性生物学特征，探索Foxp3基因对上皮性卵巢癌的治疗价值。该研究有利于揭示上皮性卵巢癌发生的分子机制，为其临床诊断和治疗提供实验基础。

Foxp3基因不仅是调节性T细胞生长发育和发挥免疫抑制功能的关键因子；最近文献报道Foxp3基因在多种癌细胞中表达显著下降，推测其可能为一新的肿瘤抑制基因。本项目一方面从上皮性卵巢癌细胞自身角度出发，探讨Foxp3基因在上皮性卵巢癌细胞内的作用、调控机制以及与卵巢癌化疗的相关性。首先，收集手术组织标本若干，分析Foxp3基因表达水平与上皮性卵巢癌的恶性生物学特征的关系，揭示Foxp3基因与上皮性卵巢癌预后的关联；探讨上皮性卵巢癌细胞内Foxp3基因发挥肿瘤抑制功能的分子机制；分析上皮性卵巢癌细胞中Foxp3基因表达与其分泌的细胞因子的关系，揭示Foxp3基因的分子免疫机制；在裸鼠卵巢癌模型上进一步验证Foxp3基因上调表达是否抑制上皮性卵巢癌细胞的恶性生物学特征，探索Foxp3基因对上皮性卵巢癌的治疗价值。另一方面，探讨在上皮性卵巢癌缺氧微环境下，Foxp3(+)Tregs细胞与上皮性卵巢癌细胞之间的串话及可能机制，发掘上皮性卵巢癌潜在的免疫调节机制。结果显示Foxp3基因在上皮性卵巢癌细胞中表达显著下降，并且在上皮性卵巢癌SKOV3细胞中发挥肿瘤抑制功能。Foxp3在上皮性卵巢癌细胞中发挥抑癌作用，可能通过mTOR信号通路和NF-kB信号通路介导，调节细胞周期蛋白CDKS、Ki-67、基质金属蛋白酶MMPs、尿激酶uPA等蛋白激酶活性而发挥肿瘤抑制作用。上调Foxp3基因表达可增强顺铂的化疗作用，并且改善耐药细胞株对顺铂的化疗敏感性，并且可能是通过调控细胞周期蛋白P27、CDKS、SKP2而发挥相关作用；通过质粒转染技术，上调上皮性卵巢癌细胞内Foxp3基因的表达水平，影响了肿瘤细胞自身的免疫分泌功能，除了分泌TGF-β因子增加，细胞因子IL-6，IL-8，IL-10的分泌水平在转染Foxp3基因后亦发生了波动，但是在不同细胞株的变化具有差异性，可能与细胞组织来源有关。模拟体内上皮性卵巢癌细胞缺氧微环境，采用免疫细胞与肿瘤细胞联合共培养体系，检测发现，调节性T细胞可通过增加肿瘤细胞IDO分泌，从而促进上皮性卵巢癌细胞迁移和侵袭。本项目初步揭示了Foxp3基因在上皮性卵巢癌细胞及调节性T细胞之间存在重要的联系，深入探讨有助于为上皮性卵巢癌的临床诊断和治疗提供实验基础和理论基础。