杨树因伤诱导型启动子的克隆及功能分析

机械损伤或病虫害侵扰引起植物一系列与防御反应有关基因的激活，杨树win基因家族是其中的一类，根据报道的杨树win家族中编码产物类似于白薯和豆类胰蛋白酶抑制剂基因的上游序列，用PCR方法从欧洲黑杨和美州黑杨的基因组中扩增出两个大小有差异的DNA片段WINP（705bp）和WIDP（791bp）。测序后构建了嵌合GUS报告基因的中间载体。用根癌农杆菌LBA4404转化烟草和杨树后获得了若干转化植株。对19株PCR反应呈阳性的转化烟草损伤处理后，组织化学染色结果表明有8株表现GUS活性，并有明显的因伤诱导效应。GUS酶活分析表明WINP比WIDP诱导活性高2.6倍且诱导效应有系统性。对转基因杨树的初步分析表明该启动子也有因伤诱导效应，可用于抗病、抗虫因伤诱导型表达载体的构建。