姜VDE基因启动子的克隆及功能分析

姜喜温不耐强光，强光下易发生光抑制现象，叶黄素循环是发生光抑制时排散多余光能的最重要途径之一，紫黄质脱环氧化酶（VDE）是叶黄素循环过程的关键酶，在防御光抑制破坏中发挥重要作用。本实验室在已成功克隆姜VDE基因（GVDE，登录号为AY876286）的基础上，拟采用反向PCR (inverted PCR)与改进的基因组步移(genome walking)技术克隆GVDE基因启动子，分析序列；PCR法缺失部分片段（元件），构建各元件缺失体载体，转基因烟草或拟南芥，通过报告基因活性变化分析该启动子的核心元件；替换pCAMBIA1300-221载体上的CaMV35S启动子，比较两种启动子对报告基因活性的影响；同时探索光强、AsA等对转基因烟草或拟南芥报告基因表达的影响，以及转基因烟草或拟南芥光合、叶绿素荧光特性和叶黄素循环组分的变化，深入研究该启动子的调控原理，为姜光抑制的防御提供重要的理论依据。