激活素A/抑制素A在卵巢内部LH信号通路中的作用机制

妇女生理周期中的LH峰是一个非常重要的"扳机"时点，触发了与正常排卵相关的多重卵巢内部程序。近年研究证实表皮生长因子（EGF）信号网络是LH的下游信号分子，是LH峰触发的一系列生理活动的核心通路。但EGF样生长因子并不直接作用于卵母细胞，在卵丘颗粒细胞与卵母细胞之间还存在一种目前未知的EGF网络的下游信号分子，由它介导着卵母细胞的核、质成熟。本研究以小鼠卵丘-卵母细胞复合物为研究对象，使用分子生物学方法以及细胞信号转导技术观察EGF及MAPK信号通路对激活素/抑制素βA亚基、受体mRNA及蛋白表达水平的影响，论证ACTA/INHA是卵泡内部EGF网络的下游信号分子、MAPK信号通路的生理性靶蛋白。通过对ACTA/INHA诱导卵母细胞成熟的分子机制的探讨及其在卵母细胞体外成熟技术中的应用尝试，进一步揭示ACTA/INHA在卵巢内部LH信号通路以及卵母细胞成熟过程中的地位和临床应用价值。

妇女生理周期中的LH 峰是一个非常重要的“扳机”时点, 触发了与正常排卵相关的多重卵巢内部程序, 包括性激素的合成、卵丘细胞团的扩散以及卵母细胞的成熟等。它是妇女体内最重要的生殖生理现象, 深入了解LH峰所触发的卵巢内信号通路对于评价以及调控这些生理过程至关重要。本研究首次借助完全模拟了卵母细胞的体内成熟过程的生物模型, 从正反两个方向证实了ACTA/INHA是卵巢内部EGF 网络的下游信号分子, 而EGF 对两者具有不同的调控方向并呈现显著的时间依赖性和剂量依赖性。说明可能只有当ACTA/INHA 以某种特定的比例存在于培养体系中时才能达到卵母细胞的核/ 质同步成熟。本研究同时对EGF/ACTA促进卵母细胞成熟的作用机制进行了探讨，通过对卵母细胞内部的CAMP含量进行测定显示：EGF作用于卵丘卵母细胞复合物（COC）以及ACTA作用于裸卵均可诱导卵母细胞内部CAMP水平显著下降约1/2。而当EGF作用于裸卵或者ACTA作用于COC时却并不伴有CAMP含量的改变。说明EGF通过调节颗粒细胞ACTA/INHA的分泌，ACTA/INHA与卵母细胞表面受体结合，继而诱导了卵母细胞内部cAMP水平的下降，从而启动了卵母细胞的成熟过程。EGF、ACTA 对不成熟卵母细胞体外成熟、受精及早期胚胎发育情况的影响EGF可促进卵母细胞的体外成熟和早期胚胎的发育,这种作用可以被EGFR拮抗剂所拮抗,同时也可以被激活素/抑制素的结合蛋白FS所拮抗。ACTA、可促进裸卵的体外成熟和早期胚胎的发育,这种作用可以被其特异性结合蛋白FS所拮抗。