组织蛋白酶S在早期RA中的作用：一个潜在的治疗新靶点

类风湿性关节炎（RA）是一种高发病率和致残率的疾病，早期诊断和治疗尤为重要。组织蛋白酶S（Cathepsin S）是木瓜蛋白酶超家族的一个成员，既往研究证实其在抗原递呈中起重要作用，我们前期研究也发现组织蛋白酶S可促使微血管的形成，并可水解多种蛋白，根据它的作用特点，我们提出假说：在RA的发病机制中，组织蛋白酶 S除主要的抗原递呈作用外，还在血管翳的形成、细胞外基质的降解及其它蛋白酶的激活中起重要作用，可能是导致RA发病的一个重要病理因素。为验证上述假说，我们拟通过临床和小鼠模型验证组织蛋白酶S在RA滑膜中高表达，再在基因敲除组织蛋白酶S的小鼠上尝试建立动物模型，培养滑膜巨噬细胞和成纤维细胞，最后给基因敲除的小鼠补充组织蛋白酶S后再建立动物模型等研究，阐释组织蛋白酶S在RA早期的作用机制，为寻找RA治疗的新靶点提供实验依据。

组织蛋白酶S(CTSS)是木瓜蛋白酶超家族的一个成员，主要在抗原提呈中起作用。目前对CTSS在类风湿关节炎（RA）中的作用研究较少，既往研究发现CTSS敲除的小鼠对胶原诱导的关节炎敏感性显著降低，在RA的滑液中CTSS水平显著升高，这些研究均提示CTSS参与类风湿关节炎的发病。本研究在临床试验方面，我们发现RA的血清中CTSS表达较正常对照组显著升高。此外，我们还对RA病人血清以及正常对照血清进行了细胞因子芯片分析，筛选出了一些新的RA致病因子。 为了进一步验证芯片结果，我们收集54例RA血清以及26例对照血清，通过ELISA的方法对其中6个新的表达有差异的因子进行了验证试验，结果与芯片结果一致，均在RA血清中高表达，表明这6个细胞因子均可能参与RA的致病，并且其中5个细胞因子与疾病的活动度相关，说明这5个细胞因子可能可以成为反映RA疾病活动度的新指标。在体内试验方面，我们制作了小鼠CAIA关节炎模型，发现CTSS在模型小鼠的踝关节滑膜中高表达。在体外试验方面，我们发现激活的小鼠骨髓源性的肥大细胞（BMMCs）可以减低小鼠软骨细胞内II型胶原以及糖胺多糖(GAG)的表达； TNF-α可以上调BMMCs表达MMP-3、MMP-9、IL-17，且具有浓度依赖性和时间依赖性；IFN-γ在mRNA和蛋白水平上均可以促进肥大细胞细胞系（P815）及BMMCs的CTSS表达，并呈一定的时间、剂量依赖关系。此外，我们前期研究发现透明质酸介导的细胞游走受体（RHAMM）在滑膜细胞中(FLS)的表达远高于外周血单个核细胞（PBMC），表明RHAMM具有组织特异性，RHAMM的干扰实验结果也表明，RHAMM在类风湿关节炎的炎症因子调控及关节破坏中起到了重要的作用。