Let-7在卡波氏肉瘤病毒复制中的作用及机制研究

卡波氏肉瘤(KS)是一种好发于皮肤等部位的恶性肿瘤，是艾滋病人主要的并发症和死因。卡波氏肉瘤相关病毒（ KSHV）是KS的病原体，其裂解复制是病毒致病的重要条件,而ERK，JNK和p38MAPK通路的活化在此过程中起着关键作用。我们前期研究发现在KS组织中宿主microRNA let-7表达降低，而位于MAPK通路上游的let-7靶基因MAP4K4表达则显著上调。提示KSHV可能通过抑制宿主let-7表达，激活MAPK通路调控自身的裂解复制。本研究先用KSHV感染宿主细胞，观察对let-7表达水平的影响，其次通过改变let-7表达水平，研究对KSHV裂解复制的影响；再用Luciferase assay验证let-7与MAP4K4的直接靶向调控关系；最后改变MAP4K4表达水平探讨对ERK，JNK和p38MAPK通路的影响，力图进一步揭示KSHV裂解复制的分子机制，为KS防治提供新的线索。

课题组的前期研究发现具有抑癌基因功能的let-7 miRNA在经典型卡波氏肉瘤(KS)组织内表达下调，而其预测的靶基因MAP4K4表达显著增加。MAP4K4是调控卡波氏肉瘤相关病毒(KSHV)的ERK、JNK和p38信号通路的上游因子。因此我们假设let-7可通过调控MAP4K4的表达，影响ERK、JNK和p38信号通路活性，进而影响KSHV的复制和致病。本研究的结果证实：(1)KSHV感染可以下调293T细胞let-7的表达水平,上调MAP4K4表达；（2）let-7a可以特异抑制MAP4K4基因表达；（3）let-7a可抑制KSHV的复制，而MAP4K4激活KSHV的复制；(4)let-7a抑制ERK/JNK/p38信号通路,而MAP4K4可激活ERK/JNK/p38信号通路。结论： MAP4K4 是调控KSHV复制的一个关键宿主因子，let-7a通过抑制MAP4K4表达，抑制ERK/JNK/p38信号通路活性，降低KSHV的复制水平。