标准化戊型肝炎病毒急性和慢性感染兔模型的建立和应用

Hepatitis E virus (HEV) is a leading cause of acute viral hepatitis worldwide. In recent years, cases of chronic HEV infection and HEV-associated extra-hepatic manifestations emerged and are increasing. These discoveries have aroused global attention. Some major questions regarding the pathogenesis, prognosis and antivirals testing of HEV are yet to be solved. However the lack of an efficient cell culture system and a desirable small animal model hindered our understanding of this important but poorly understood virus. Thus, this project “The establishment and application of a standardized rabbit model for acute and chronic hepatitis E virus infection” has critical meaning for the basic and clinical studies of HEV. Due to the species barrier and susceptibility of HEV, the applicable animal models are nonhuman primates and swine. However, the extensive application of these animals is unpractical because of the high cost, difficulties in handling and ethical concerns. Based on the published studies from our group and other groups, HEV-infected rabbits could present with acute/chronic hepatitis E and extra-hepatic manifestations, which shared high similarity with what was observed in human patients. Moreover, the healthy rabbit is easy to access and economic for use in large-scale experiments. This is what is required to be a suitable animal model for HEV infection study. Hence, this project aims at establishing a repeatable standardized rabbit model for acute and chronic HEV infection by using unified and standard HEV strains and animal. The establishment of this model will provide a valuable in vivo tool for addressing important and unsolved research questions of HEV.

近年发现戊型肝炎病毒（HEV）不仅能引起急性病毒性肝炎，还可导致慢性戊肝和较严重的肝外疾病，被临床广泛关注。因此，有关HEV的致病机制、感染后转归和新型抗病毒药物研发等已成为HEV研究亟待解决的热点。但迄今尚无有效的用于HEV感染研究的细胞模型，也缺乏理想的小动物感染模型。因此本项目“标准化戊型肝炎病毒急性和慢性感染兔模型的建立和应用”对HEV基础研究和临床应用均有重要意义。由于HEV种属和易感性等特点，目前可用的实验动物是非人灵长类和猪，但成本、操作和伦理问题都制约着其广泛使用。文献报道与本课题组前期工作显示，HEV感染兔可出现与临床疾病高度相似的急、慢性戊肝表现并出现HEV肝外复制所导致的相关疾病，且兔作为实验动物具有成本低和操作简便等优点，适合作为疾病动物模型。因此，本研究拟通过使用标准化毒株及动物来建立可重复的标准化HEV急性和慢性感染兔模型，为解决HEV热点问题的研究提供平台。

戊型肝炎病毒（HEV）是目前引起全球范围内急性病毒性肝炎的重要病原体，每年约造成2000万人感染，330万人发病。以往认为HEV感染只引起急性自限性疾病，但近年来研究发现HEV感染免疫抑制人群，如器官移植受者后，可引发慢性戊型肝炎并可造成肝纤维化甚至肝硬化。然而，目前仍缺乏可以模拟临床HEV感染后相应疾病表现的小动物模型，阻碍了HEV致病机制、疫苗候选物评估及抗病毒药物候选物评估等工作的开展。本项目在该基金支持下，成功构建了稳定可重复的急性和慢性HEV感染兔模型，感染兔出现的病毒学指标动态变化及组织病理学改变与目前临床患者中观察到的类似。在急性HEV感染兔模型中，我们发现通过静脉注射兔HEV可稳定构建急性HEV感染，发现兔对兔HEV及基因4型HEV易感。急性HEV感染兔模型可很好的应用于抗病毒药物评估。在慢性HEV感染兔模型建立中，我们模拟临床上主要易发生慢性HEV感染的免疫抑制器官移植受者，利用环孢菌素A构建免疫低下兔模型，成功诱导慢性HEV感染发生。在感染慢性期，可见慢性感染兔发生肝脏纤维化。进一步，我们对免疫抑制兔进行了戊型肝炎疫苗评估，发现在免疫抑制前完成免疫策略可有效保护后续免疫抑制下的HEV感染，为免疫抑制人群如何选择最佳免疫时机提供了临床前数据。免疫抑制慢性HEV感染兔模型同样可用于抗病毒药物评估，目前临床常用的利巴韦林三个月疗程可完全清除感染兔体内HEV。综上，本项目顺利完成相应主要研究目标，成功建立理想的HEV感染急性和慢性兔模型，该模型不仅可在未来用于HEV感染致病机制研究，还可以很好的应用于抗病毒药物疗效评估和疫苗免疫策略有效性评估，为未来临床开发针对HEV的有效防治策略提供了重要工具。