PI3K激酶在L-选择素和PSGL-1介导的白细胞起始黏附过程中的信号转导作用研究

白细胞起始黏附是炎症过程中一系列的重要事件之一。L-选择素和PSGL-1均组成性地表达于白细胞表面的微绒毛顶端，它们一方面介导了起始黏附中白细胞被捕捉的过程，另一方面可以转导信号使白细胞活化。PI3K激酶是细胞内与一系列细胞活化的信号转导事件相关的重要信号分子，根据目前已有的文献资料和我们前期的一些预实验结果，我们推测PI3K激酶很可能是L-选择素和PSGL-1信号通路的关键整合分子之一。本项研究将在前期工作的基础上，探讨①PI3K激酶是否在L-选择素和PSGL-1引发的白细胞活化事件中起重要作用？②PI3K激酶是否可以整合以及如何整合L-选择素和PSGL-1转导的胞外信号？③PI3K激酶在转导和整合胞外信号时可能与哪些蛋白质相互作用及相互作用的分子机制是什么？本项研究内容的阐明对于深入了解炎症过程中白细胞活化的分子基础以及筛选以阻断细胞信号通路为靶点的抗炎症药物具有重要的意义

在炎症和白细胞归巢的过程中，表达于白细胞表面的L-selectin和PSGL-1（P-selectin glycoprotein ligand-1）一方面作为重要的介导白细胞滚动的黏附分子发挥着非常重要的作用；另一方面，他们也作为细胞表面的黏附分子受体起到诱导白细胞活化的信号转导作用。本课题主要探讨了在模拟生理条件下，L-selectin 和PSGL-1介导的白细胞起始黏附过程中PI3K激酶的作用和机制。我们发现：（1）用E-selectin交联白细胞表面的L-selectin和PSGL-1能够引起PI3K激酶的活化和PI3K激酶的作用底Vav1在细胞膜下的募集；（2）由E-selectin 交联L-selectin 和PSGL-1引起的F-actin的重新排布和聚集以及白细胞在E-selectin上的滚动能够被PI3K激酶的特异性抑制剂所抑制；（3）用抗体交联细胞表面的PSGL-1能够调节同样在膜上的β1-integrin活化和T-细胞在VCAM-1分子上的黏附；（4）白细胞膜上的PSGL-1被抗体交联后，c-Abl、Src 和Syk激酶被活化，活化的c-Abl and Src能够磷酸化p85-bound RhoGDI2的130Y和153Y位酪氨酸；（5） PSGL-1交联介导的β1-integrin活化和T-细胞黏附能够被c-Abl激酶和Src激酶的特异性抑制剂所抑制；（6）针对RhoGDI2和p85的shRNA能够明显减弱β1 –integrin的活化和β1-integrin介导的T细胞黏附。.本课题共已发表标注该基金资助的SCI检索论文4篇，另有3篇研究论文正在印刷和投稿中，出版教材2部，获得发明专利和吉林省科技进步二等奖各一项。