c-Abl激酶在整联蛋白avb3介导的肿瘤细胞黏着和迁移中的作用及机制研究

肿瘤细胞的黏着和迁移是肿瘤向周边组织侵袭和向远端转移的必要条件之一，这一过程由一系列黏着分子介导。研究表明，整联蛋白αvβ3在恶性肿瘤细胞表面高表达，可能是介导肿瘤细胞黏着和迁移的重要黏着分子，但相关机制有待进一步阐明。c-Abl激酶是一种非受体酪氨酸激酶，参与了细胞信号转导、细胞骨架重排等生命活动。本研究将1）建立研究肿瘤细胞迁移的多种实验模型，在此基础上确定c-Abl激酶对血小板生长因子（PDGF）诱导的整联蛋白αvβ3依赖的肿瘤细胞的细胞骨架重排、黏着斑和伪足形成、以及细胞迁移的影响；2）通过对黏着斑和伪足的形成以及蛋白质复合物分析，明确c-Abl激酶影响肿瘤细胞黏着和迁移的作用环节以及可能的作用分子；3）通过蛋白质相互作用及信号转导事件分析，揭示c-Abl激酶在参与整联蛋白αvβ3介导的肿瘤细胞黏着和迁移中的作用机制。相关问题的了解是阐明肿瘤细胞黏着和迁移分子机制的重要方面。

肿瘤细胞的黏附和迁移是肿瘤向周边组织侵袭和向远端转移的必要条件之一，这一过程由一系列黏着分子介导。整合素作为细胞膜上的黏附分子，一方面通过胞内结构域与胞内的细胞骨架结合在一起，另一方面通过胞外的球状结构域与细胞外基质连接，从而使细胞锚定在细胞外基质上。研究表明，αvβ3整合素在恶性肿瘤细胞表面高表达，可能是介导肿瘤细胞黏附和迁移的重要黏着分子，但相关机制有待进一步阐明。c-Abl激酶是一种非受体酪氨酸激酶，参与了细胞信号转导、细胞骨架重排等生命活动。.在本项研究中，我们通过transwell、单层细胞划痕等细胞迁移实验模型发现，c-Abl激酶参与了PDGF诱导的αvβ3整合素介导的黑色素瘤A375细胞的迁移。通过免疫荧光双标记实验和免疫共沉淀的实验展示，c-Abl激酶与αvβ3整合素存在于同一个蛋白质复合体中，c-Abl激酶与αvβ3整合素的相互作用依赖于c-Abl激酶的活性。通过分子之间相互作用的体外实验发现，c-Abl激酶是通过SH3结构域与talin蛋白作用进而调控αvβ3整合素在细胞迁移中的功能。研究结果为揭示肿瘤细胞迁移的机制提供了可靠的新资料。.在本课题的资助下，我们还探讨了基质金属蛋白酶-2(MMP-2)对αvβ3整合素的活性和αvβ3整合素介导的肿瘤细胞黏附和迁移的影响，发现MMP-2在αvβ3整合素的前端，定位于铺展细胞侵入性伪足的边缘。MMP-2能够通过裂解fibronectin促进αvβ3整合素介导的人黑色素瘤细胞的黏附和迁移，提示MMP-2可能起到引导肿瘤细胞迁移的作用。我们的研究同时还发现，c-Abl激酶对于中性粒在体内的募集和体外的迁移都非常重要。我们确定了Vav1是c-Abl激酶下游的一个重要的效应分子，c-Abl激酶可能通过直接磷酸化在DH结构域上的Tyr-267调节Vav1的活性。 .本项研究现已发表相关的SCI检索论文10篇，培养博士研究生4名。