SP100蛋白在喉癌细胞中的作用机制研究

肿瘤是一个多因素参与、多基因改变、多步骤发展的复杂过程，需要多种蛋白质的协同作用。SP100蛋白含有不同结构域，与相应蛋白结合，表现出肿瘤抑制因子的特性。我们的前期工作中，发现喉癌组织和细胞系中SP100表达下调，上调SP100表达后可以抑制细胞侵袭，促进凋亡，那么在喉癌细胞中，其不同结构域如何发挥作用？我们还发现在喉癌细胞中SH3GL2蛋白可以和SP100结合，具体结合位点有待确定，且SP100-SH3GL2蛋白复合物如何发挥功能也需要进一步研究。本项目通过构建真核表达载体研究SP100不同结构域生物学功能；通过生物信息学手段预测SP100、SH3GL2蛋白结合位点，构建结合片段信息的表达载体、确定结合部位；并初步探讨SP100-SH3GL2复合物在细胞中的生物学功能、分析SP100蛋白在肿瘤细胞信号传导通路中的位置，阐述其在喉癌发生发展中的作用。

肿瘤的发生发展是一个多因素参与，多基因改变，步骤发展的复杂过程，需要多种蛋白质的协同作用。SP100蛋白含有不同结构域，与不同的蛋白质结合，可以表现出肿瘤抑制因子的特性。我们的前期工作中，发现喉癌组织和细胞系中SP100表达下调，上调SP100表达后可以抑制细胞侵袭，促进细胞凋亡，本项目通过临床样本研究，发现鼻咽癌组织中SP100蛋白在RNA和蛋白表达水平上的一致性下调；在喉癌离体细胞系Hep2的研究中，发现含有SP100结构域、SAND结构域和HMG结构域的不同SP100异构体都显示出抑制细胞侵袭，促进细胞凋亡的的生物学功能，并通过裸鼠成瘤实验进行了验证；同时，我们也发现SH3GL2蛋白和含有SP100结构域的异构体在细胞核内的结合，但其复合物并未显示出对P21cip 启动子区域转录活性的影响，因此其具体的作用机制还有待于进一步探讨。本研究的结果进一步显示SP100作为潜在的肿瘤抑制基因在头颈部恶性肿瘤的发病机制中起到了一定作用，为临床筛选诊断的肿瘤标记物和进一步的肿瘤生物治疗提供了实验基础和新的思路。