基于NK细胞Angptl6途径探索益气法促心梗后血管新生机制

Myocardial infarction is one of major diseases that impact on health. Therapeutic angiogenesis plays an important role in cardiac repair after myocardial infarction. The Buyang Huangwu Decoction（BYHWD）achieved positive effect on myocardial infarction by the guide of traditional Chinese medicine theory (TCM) "Qi can Promote Blood Circulation". Our decomposing research of BYHWD showed that Qi-tonics has more significant effect on promoting angiogenesis. Further study found that Qi-tonics can activate NK cells and enhance Angiopoietin like-6 (Angptl6) expression.Based on the pharmacological research of Qi-tonics and our preliminary findings, we hypothesize that the mechanism of Qi-supplementing therapy promote angiogenesis after myocardial infarction which is related to the activation of NK cells and increasing the Angptl6 expression. In this study, we use RNA interference, lentivirus technologies,ect.as well as NK cell deficiency SCID Beige mice.We want to determine the effect of Qi-tonics on promoting angiogenesis and attenuate ventricular remodeling after myocardial infarction by inhibiting the activation of NK cells or Angptl6 pathway. Our study is helpful to decipher the mechanism of Qi-tonics promoting angiogenesis after myocardial infarction, clear the inherent mechanism of the TCM theory "Qi can Promote Blood Circulation".

心肌梗死是影响健康的重大疾病，治疗性血管新生在心梗后心肌修复中起重要作用。以中医"气能行血"理论为指导，运用补阳还五汤治疗取得良好的疗效。我们在前期工作中对补阳还五汤进行拆方研究发现：方中益气药组具有更为显著的促血管新生作用。进一步研究发现：多种益气药能活化NK细胞上调血管生成素样蛋白6（Angptl6）表达。基于既往益气药药理学研究成果及本科组前期研究结果，我们提出假说：NK细胞Angptl6途径可能是益气法促进心梗后心肌血管新生的作用靶点。本研究拟采用RNA干扰、慢病毒等技术，运用NK细胞缺陷SCID Beige小鼠，抑制NK细胞或NK细胞Angptl6途径后观察益气法对心梗后心肌血管新生以及心室重构的影响，并采用NK细胞与心肌微血管内皮细胞共培养体外模型对体内研究结果进行进一步验证。明确NK细胞Angptl6途径在益气法促心梗后血管新生中的作用，进一步探索"气能行血"的内在机理。

心肌梗死是影响健康的重大疾病，治疗性血管新生在心梗后心肌修复中起重要作用。以中医“气能行血”理论为指导，运用补阳还五汤治疗取得良好的疗效。我们在前期工作中对补阳还五汤进行拆方研究发现：方中益气药组具有更为显著的促血管新生作用。进一步研究发现：多种益气药能活化NK细胞上调血管生成素样蛋白6（Angptl6）表达。基于既往益气药药理学研究成果及本科组前期研究结果，我们提出假说：NK细胞Angptl6途径可能是益气法促进心梗后心肌血管新生的作用靶点。本研究拟采用RNA干扰、慢病毒等技术抑制NK细胞或NK细胞Angptl6途径后观察益气法对心梗后心肌血管新生以及心室重构的影响，并采用NK细胞与心肌微血管内皮细胞共培养体外模型对体内研究结果进行进一步验证。明确NK细胞Angptl6途径在益气法促心梗后血管新生中的作用，进一步探索“气能行血”的内在机理。通过本项目的研究已发表SCI文章3篇，在投稿SCI文章1篇，发表中文期刊8篇。所有工作均按照实验计划完成，以下为本研究主要发现：①黄芪能促进心梗后大鼠的血管新生。②黄芪含药血清能升高体外培养NK细胞的活性。③黄芪含药血清处理NK细胞上清能促进血管内皮细胞的增殖及迁移。④采用数字基因表达谱分析技术发现黄芪含药血清能上调NK细胞Angptl6的表达。⑤抑制NK细胞Angptl6能阻断黄芪含药血清预处理NK细胞上清诱导的血管内皮细胞增殖及迁移。⑥黄芪多糖能升高NK细胞的活性。⑦黄芪多糖能升高NK细胞Angptl6的表达。⑧黄芪多糖预处理NK细胞上清能促进血管内皮细胞的增殖及迁移。⑨抑制NK细胞Angptl6能阻断黄芪多糖预处理NK细胞上清诱导的血管内皮细胞增殖及迁移。