JAK2-STAT3通路调控NK/T细胞淋巴瘤PD-L1表达增高的机制探讨

NK/T-cell lymphoma (NKTCL) is characteristic of high invasiveness, rapid aggressiveness and poor prognosis. Some research shows that tumor cells induce immunotolerance by passing negative regulatory signals through PD-L1/PD-1 signaling pathway, consequently，promoting immune escape, which partially accounts for the poor curative effect and prognosis. The PD-1 ligand genes, are located on chromosome 9p24.1. Our previous study shows that PD-L1 is highly expressed in both NKTCL cell lines and tumor tissue. Besides, 3 patients with relapsed and refractory NK/T-cell lymphoma show fine curative effect to PD-1 antibody. Nevertheless, the specific mechanism and regulative factors of PD-L1 overexpression have not been elucidated yet. We further performed genome-wide sequencing on NKTCL cell lines (SNK-6 and YTS) and found that 9p24.1 amplification was present in these cell lines. Therefore, we speculate that the presence of 9p24.1 amplification and JAK2-STAT3 pathway activation in NKTCL cell line directly or indirectly promotes the overexpression of PD-L1 in NKTCL. To verify this hypothesis, we intend to analyze the molecular mechanism of 9p24.1 amplification and JAK2-STAT3 pathway activation in PD-L1 expression abnormality in NKTCL in three aspects of human tissue samples, cells and animal models. This study is intended to find potential therapeutic targets, which will provide a theoretical foundation for the clinical treatment of NKTCL.

NK/T细胞淋巴瘤(NKTCL)具有高侵袭性、病程进展快、预后差等特点。研究表明肿瘤细胞通过PD-L1/PD-1通路传递负性调控信号诱导免疫耐受，促使免疫逃逸，是NKTCL疗效及预后差的原因之一。我们前期研究显示：PD-L1在NKTCL细胞系和组织中高表达，3例复发难治NKTCL患者对PD-1抗体治疗具有较好的疗效。PD-L1表达的具体机制和调控因素尚不清楚。我们进一步对NKTCL细胞系(SNK-6和YTS)进行了全基因组测序和拷贝量验证，结果发现存在9p24.1扩增，JAK2-STAT3通路活化。我们推测：NKTCL细胞系中9p24.1位点扩增及JAK2-STAT3通路活化可能直接或间接的促进NKTCL中PD-L1表达增高。为验证此假说，我们将深入解析9p24.1扩增及JAK2-STAT3通路活化NKTCL中PD-L1表达异常的分子机制，寻找潜在治疗靶点，为NKTCL的治疗提供理论依据。

恶性肿瘤的发生和发展与机体的免疫状态密切相关，NKTCL 同样存在免疫逃逸，T 细胞无法有效的杀伤肿瘤细胞。据报道，影响 T 细胞在肿瘤部位抗肿瘤的主要因素为免疫检查点的高表达。 B7 家族中的程序性凋亡受体 1 的配体（PD-1）和其配体（PD-L1）在 T 细胞的激活和耐受中起到了关键作用，研究发现它们通过与其受体 PD-1 相互作用，传递负性调控信号诱导肿瘤抗原特异性 T 细胞的凋亡和免疫无能，但具体调控机制尚不清楚。因此深入开展 NKTCL 中 PD-1/PD-L1 通路在肿瘤免疫逃逸相关机制的基础和临床研究，从而寻找潜在的治疗靶点，对提高NKTCL的治疗水平具有重要的理论意义和临床价值。考虑NK/T细胞淋巴瘤患者外周T淋巴细胞的PD-1异常表达抑制其杀伤功能。因此我们拟研究NKTCL患者外周血CD8+T细胞表面PD-1表达情况及分泌肿瘤坏死因子a（TNF-α），干扰素（IFN-γ）细胞内因子水平，并探讨其临床意义。结果 外周血CD8+T细胞的PD-1表达水平在NKTCL患者组均显著高于对照组（p<0.01）。外周血PD-1+CD8+T细胞分泌细胞内因子TNF-α，IFN-γ水平在NKTCL患者组均显著低于对照组（p<0.01）。NKTCL患者组中PD-1+CD8+T细胞分泌内因子TNF-α，IFN-γ水平显著高于PD-1-CD8+T细胞（P<0.05）。不同临床病理学参数的NKTCL患者PD-1在外周血CD8+T细胞的表达及PD-1+CD8+T细胞分泌内因子水平比较。CD8+T细胞的PD-1表达水平在AnnArbor分期Ⅲ期-Ⅳ期、IPI评分>2分、LDH≥245u/L、B2-MG≥3ng/L、有B症状患者中较高；分泌细胞内因子IFN-γ水平在AnnArbor分期Ⅲ期-Ⅳ期、IPI评分>2分患者中较低；TNF-α水平在AnnArbor分期Ⅲ期-Ⅳ期、LDH≥245u/L、B2-MG≥3ng/L、患者中较低(P<0.05)。NKTCL患者患者在4周期化疗后PD-1在CD8+ T细胞的表达水平较化疗前降低，PD-1+CD8+ T细胞分泌细胞内因子TNF-α，IFN-γ水平较化疗前升高，差异具有统计学意义（P<0.05）.结论 NKTCL患者外周血CD8+T细胞PD-1表达水平升高，分泌细胞内因子TNF-α，IFN-γ降低，上述现象与临床数据参数有关。