阿托伐他汀预防CEA补片成型术后再狭窄机制的研究

Carotid endarterectomy and pericardial patch angioplasty have been the most important surgery for preventing stroke. However, re-stenosis after this surgery is one of the complications which mostly affect the prognosis. Atorvastatin can prevent re-stenosis after intimal injury effectively. ADAM10 can down-regulate ephrinB2 which is the crucial molecule for EPC’s differenciation and proliferation. We found that ADAM10 is the target of miR-140. Transfection of miR-140 can down-regulate expression of ADAM10 significantly. Our pre experiment identified that ADAM10 expression in EPC on pericardial patch was decreased significantly by atorvastatin treated. The results imply that atorvastatin may take effect in preventing re-stenosis through EPC’s differenciation and proliferation on the patch by miR-140/ADAM10/ephrinB2 pathway. Our study firstly combines with clinical research, animal study and cellular experiment to explore the mechanism how atorvastatin prevent re-stenosis after angioplasty. Clarification of the regulation pathway miR-140/ADAM10/ephrinB2 may provide new theoretical evidence for drug prevention of re-stenosis after patch angioplasty.

颈动脉内膜剥脱术加补片血管成型术是预防脑卒中的重要外科手术，但术后再狭窄严重影响其疗效。EPC在补片的表面的分化、增殖是导致再狭窄发生的关键因素。阿托伐他汀可有效预防内膜损伤后血管内膜再狭窄。结合去整合素和金属蛋白酶10可抑制EPC分化、增殖的关键因子ephrinB2表达。我们发现ADAM10是miR-140的潜在靶点，转染miR-140可显著降低ADAM10表达，预实验证实阿托伐他汀处理后补片表面EPC ADAM10表达显著降低。以上结果提示阿托伐他汀可能通过miR-140/ADAM10/ephrinB2通路影响EPC在补片表面的增殖、分化预防术后再狭窄的发生。本研究首次结合临床研究、动物和细胞实验，探讨阿托伐他汀预防术后再狭窄的机制，阐明其是否与调控miR-140/ADAM10/ephrinB2通路有关，有助于阐明术后再狭窄形成的机制，为药物预防再狭窄提供新的理论依据

项目背景：颈动脉内膜剥脱术（CEA）+补片成型术是预防脑卒中的重要手术，但术后再狭窄严重影响其效果。阿托伐他汀可有效预防内膜损伤后的血管再狭窄，但其机制尚无文献报道。本研究着眼于这一机制，试图了解CEA补片在其愈合过程中阿托伐他汀在短期内促进手术部位的动脉内膜修复的机制及其调控分子的变化水平。.研究内容：本研究的主要内容为动物在体实验。首先建立大鼠肾下腹主动脉心包补片成形术模型。对建模成功动物随机分为阿托伐他汀不同剂量干预组（0mg为对照组，2.5mg，5mg，10mg）。在1周和1月时间点获得标本。并进行病理检查（H&E染色），免疫组化，免疫荧光，rt-PCR，Western-blot等。检测分子包括miR-140，ADAM-10，ephrinB2等。.重要结果：EPC细胞在血管成型术后后心包补片的愈合过程中受到阿托伐他汀干预后，其增殖和分化能力提高，从而促进补片上的内膜修复过程。这一愈合机制是阿托伐他汀通过上调体内miR-140表达水平，降低ADAM-10水平而引起ephrinB2表达水平增加而产生的。本实验证实了阿托伐他汀对于血管成型术后补片愈合过程起作用。同时证实这一作用通过miR-140-ADAM10-ephrinB2途径进行调节。且调节过程存在时间依赖性和对阿托伐他汀的剂量依赖性。.关键数据：1 阿托伐他汀在术后1月内可引起补片内膜增厚且呈时间和剂量依赖性；2 补片上的内皮祖细胞具有一定的增殖和分化能力；3 阿托伐他汀通过上调miR-140，下调ADAM-10继而增加ephrinB2表达对补片上的EPC细胞起作用。.科学意义：本研究完成了项目计划中的既定实验。从部分细胞实验和在体动物实验检验了假说是否成立。阿托伐他汀在血管成形术后的补片愈合机制中起到一定作用。这一作用通过miR-140-ADAM10-ephrinB2途径进行调节。调节过程存在时间依赖性和对阿托伐他汀的剂量依赖性。ephrinB2表达的增加在补片成型术后短期内对内膜的修复（内膜形成和增厚）具有一定的促进作用。从而说明动脉成型术后服用阿托伐他汀在短期内有利于手术动脉的内膜修复。并明确了阿托伐他汀在术后促进动脉内膜修复的其中一个机制。发现这一机制有助于探讨补片远期愈合过程并寻找正向干预方法。