翻译调控肿瘤蛋白（TCTP）的高表达与结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤细胞株TRAIL耐受的关系及可能的调控机制探讨

ENKTCL-N是我国最常见的结外非B细胞侵袭性淋巴瘤，它病程进展快，预后较差。目前尚无最佳的治疗方案，疗效也不确定。TRAIL能选择性的诱导肿瘤细胞和转化细胞发生凋亡，该特点使我们希望能将其应用于ENKTCL-N治疗中。但前期研究表明ENKTCL-N细胞株SNK6为TRAIL耐受株，高表达TCTP蛋白。但阿霉素对该细胞株有轻度促凋亡作用，一定浓度阿霉素作用后其TCTP蛋白明显下调，且发现阿霉素与TRAIL联合应用后凋亡显著增加，提示SNK6细胞株中TCTP蛋白的高表达可能与TRAIL耐受有关。故本研究拟通过建立稳定的TCTP蛋白表达下调的SNK6细胞株，检测其对TRAIL敏感性的改变。并通过比较蛋白组学筛选、鉴定及验证与TCTP-TRAIL耐受相关的可能蛋白，初步绘制TCTP-TRAIL耐受的可能调控机制图，为进一步探讨如何逆转TRAIL耐受的难题奠定理论基础。

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）能特异地诱导肿瘤细胞凋亡，而对正常细胞几乎无毒性，已完成的和正在进行的临床I期和II期试验也显示临床效果良好而无明显毒性效应。然而，不同肿瘤细胞对TRAIL作用反应各异，甚至部分肿瘤细胞对TRAIL作用无反应，即TRAIL耐受，这对其临床应用提出了挑战。在淋巴造血组织肿瘤中，结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤（ENKTCL-N）、急性早幼粒细胞白血病（APL）和慢性粒细胞白血病（CML）都有相当部分病例治疗效果差、预后不良和现有药物毒副作用明显等缺点，引入新的药物和改变治疗策略是当务之急。TRAIL能否用于上述肿瘤的治疗？其反应如何？是否存在TRAIL耐受及其机制等都是需要探讨的问题。翻译控制肿瘤蛋白（TCTP）是一种高度保守、广泛表达的多功能蛋白，具有多种重要的生物学功能，其表达与肿瘤细胞对TRAIL作用反应的研究尚未见报道。本研究主要开展以下两方面工作：（1） 用MTT和流式细胞术检测ENKTCL-N细胞株SNK6、SNT8，APL 细胞株NB4，CML细胞株K562对TRAIL作用的反应，并探讨其发生机制及其调节方法；（2）构建TCTP-shRNA重组干扰慢病毒，下调靶细胞内源性TCTP的表达，比较TCTP表达下调前后靶细胞对TRAIL作用敏感性的变化，以及对细胞本身生物学行为的影响。通过本研究发现：4株细胞对TRAIL作用的反应不尽相同，NB4为TRAIL中度敏感细胞株，SNK6、SNT8和K562 为不敏感（耐受）细胞株；4株细胞对TRAIL作用敏感性不同的原因可能主要与TRAIL信号通路下游分子有关；各细胞株表面死亡受体的表达足以促发TRAIL凋亡信号，欺骗受体的表达可能不是导致TRAIL耐受的主要原因；Doxorubicin与TRAIL有一定的协同作用，能部分逆转SNK6细胞株的TRAIL耐受；成功构建TCTP-siRNA重组慢病毒并有效感染及沉默K562细胞内源性TCTP蛋白的表达；TCTP表达与K562细胞的分化有关，下调TCTP蛋白表达促使K562细胞向成熟方向分化；TRAIL敏感性可能与TCTP蛋白表达有关，但需进一步验证。