布鲁顿酪氨酸激酶(Btk)抑制剂对B细胞非霍奇金淋巴瘤的作用及机制

The Bruton's tyrosine kinase (Btk) pathway is a downstream mediator of the B-cell receptor (BCR) pathway, which is crucial in B-cell production and maintenance, and a potential therapeutic target. The constitutive activation of this pathway plays a significant role in proliferation and survival in B-cell NHL. The Btk PCI-32765 already showed its potential anti-tumor ability toward B-NHL in vitro and in clinical trials. But the different status and reason for this constitutively activation of Btk in different subtypes of B-NHL, detailed anti-tumor mechanisms of PCI-32765 is still unknown. In our fundamental experiment we found that Btk gene the 457th nucleotide showed the single nucleotide polymorphism (SNP) loci, may induce the constitutively activated Btk in B-NHL. Furthermore, PCI-32765 could inhibit proliferation of JVM2 cell lines through suppression of phosphorylation of Btk, PLCγ2 and ERK. Totally, PCI-32765 is potential new target cancer therapy for the treatment of B-NHL.

布鲁顿酪氨酸激酶（Btk）是BCR信号传导通路中重要的下游分子，调节B细胞的增殖、分化和凋亡，Btk信号通路的持续活化可能参与了B细胞非霍奇金淋巴瘤（B-NHL）的发生。针对该靶点所开发的抑制剂PCI-32765在某些类型B-NHL中已显示出较好疗效。但是不同B-NHL肿瘤组织中Btk表达量、活化状态以及诱导其持续活化的原因尚不十分明确，与其他抗淋巴瘤靶向药物先明确机制再研发药物的过程不同，PCI-32765的详细抗淋巴瘤机制还有待探讨。我们前期研究发现不同类型B-NHL均存在Btk过量表达和持续活化，且可能与Btk[457]基因多态性密切相关。体外研究还提示PCI-32765可通过降低Btk、PLCγ2和ERK的磷酸化水平来抑制JVM2淋巴瘤细胞系增殖。本研究拟进一步在临床病例中验证该结果，有望丰富Btk作为B-NHL临床治疗靶点的理论依据，并为第二代Btk抑制剂研发提供基础数据。

B细胞非霍奇金淋巴瘤（B-NHL）的治疗方式正在经历从传统化疗到半靶向的单克隆抗体治疗、再到小分子靶向药物的突破性发展。利妥昔单抗联合化疗虽然明显改善了多种B-NHL的预后，但仍有约1/3晚期B-NHL患者面临初次治疗无效或短期内复发进展的困难。目前在B-NHL发病机制研究领域，BCR信号转导通路日益受到关注，慢性活化的BCR信号转导通路被认为与B-NHL肿瘤细胞存活及恶性增殖相关，并有望成为B-NHL治疗的新靶点。针对BCR信号转导通路中关键蛋白酪氨酸激酶布鲁顿酪氨酸激酶（Btk）所开发的靶向抑制剂Ibrutinib已在临床试验中展现其高效、低毒的良好疗效。但Ibrutinib对B-NHL细胞增殖抑制作用及相关耐药机制仍有待进一步探讨。在本研究中我们发现Ibrutinib可通过诱导Caspase通路依赖的细胞凋亡发挥肿瘤增殖抑制作用，并下调趋化因子CCL3和CCL4的表达水平，但不同的GCB-DLBCL细胞系对其存在药物敏感性差异。在进一步的研究中，Real-Time PCR和蛋白印迹结果显示不同的GCB-DLBCL细胞系中Btk基础表达水平及磷酸化程度与药物敏感性差异无关。但是Ibrutinib处理后BCR信号转导通路下游的p-ERK蛋白活性水平的下降程度反映了不同的GCB-DLBCL细胞药物敏感性的差异。因此，上述结果提示Ibrutinib可用于GCB-DLBCL的临床治疗，淋巴瘤细胞内p-ERK水平的下降程度可能成为判断其疗效的预测指标。.截止到目前，该课题已经培养博士研究生两名，相关研究结果已经投稿至 Cancer Letters及Clinical Cancer Research。