B7-H4在侵袭性非霍奇金淋巴瘤免疫逃逸中的作用和机制研究

Aggressive non-Hodgkin's lymphoma is the most common type of aggressive lymphoma. Although progress has been made in the management of aggressive NHL in the past decade, persistent remissions are usually not achieved and the management of patients with relapsed or refractory aggressive NHL is still challenging. The B7 family molecules play important roles in regulating T cell immune response. B7-H4, an important member of B7 family molecule,has been reported to play a vital role in the occurrence and development of certain tumors, which have not been reported in aggressive NHL. Our preliminary study proved that aggressive NHL cells expressed B7-H4, anf its expression upregulated after inflammation stimulation. On the basis of previous research, our project is intended to adopt human primary aggressive NHL tumor cell and aggressive NHL cell line as the research object, Use immunological and molecular biology research methods,study the abnormal expression of B7-H4 molecule, observe T cell proliferation and activation, clarify the specific immune escape mechanism of aggressive NHL cells mediated by B7-H4 molecule. The research results will provide new biological target for T cell-based immunotherapy.

侵袭性非霍奇金淋巴瘤（NHL）是最常见的一种淋巴瘤。尽管近年来其临床疗效有所改善，但侵袭性NHL仍是一种不可治愈的疾病，肿瘤缓解持续时间较短，很大一部分患者死于复发或难治。B7家族分子是调节T细胞免疫应答的重要分子，目前已发现其重要成员B7-H4在某些肿瘤发生发展起重要作用，但在侵袭性NHL中的研究尚未报道。本项目组前期研究发现侵袭性NHL细胞表达B7-H4，且通过炎症刺激后B7-H4分子表达明显上调。本课题拟以人侵袭性NHL肿瘤原代细胞及细胞系为研究对象，在已有的研究基础上，采用免疫学和分子生物学研究方法，通过研究侵袭性NHL肿瘤细胞异常表达B7-H4分子，观察T细胞增殖活化及CTL细胞抗肿瘤细胞能力的变化，进一步探索B7-H4介导侵袭性NHL细胞免疫逃逸中的具体作用及其可能机制，从而为T细胞为基础的免疫治疗提供新靶点。

非霍奇金淋巴瘤（NHL）是最常见的一种淋巴瘤,侵袭性强。尽管近年来其临床疗效有所改善，但NHL仍是一种不可治愈的疾病，肿瘤缓解持续时间较短，很大一部分患者死于复发或难治。B7家族分子是调节T细胞免疫应答的重要分子，目前已发现其重要成员B7-H4在某些肿瘤发生发展起重要作用，但在NHL中的研究尚未报道。我们对NHL B7-H4的表达、调控及其在免疫逃逸中的作用和机制进行研究。.我们的研究发现, NHL细胞表达B7-H4。我们使用免疫组织化学染色方法，检测了60例非霍奇金淋巴瘤患者和15例淋巴结炎患者B7-H4蛋白的表达水平。研究发现，NHL患者表达B7-H4蛋白；而且，NHL患者B7-H4的表达水平较淋巴结炎患者明显升高。B7-H4在NHL的表达调控机制目前还不清楚。我们进一步探讨了不同炎症因子对NHL细胞B7-H4的表达调控。研究发现，炎症因子IFN-、IL-6和IL-10上调NHL细胞B7-H4的表达水平。其他炎症因子如IL-2、IL-4、LPS和TNF-不能上调NHL细胞B7-H4的表达。肿瘤相关巨噬细胞上调NHL细胞表面B7-H4的表达水平，这主要通过分泌IL-6及IL-10来介导。为进一步研究，我们建立了NHL特异性反应性T细胞株。使用LDH方法，检测建立的四株NHL特异性反应性T细胞株的细胞毒性杀伤功能。NHL特异性反应性T细胞株不仅杀伤各自的肿瘤靶细胞，也杀伤其他NHL患者的原代细胞，但不杀伤髓系来源的白血病细胞株K562，说明自然杀伤细胞在NHL特异性反应性T细胞株的毒性杀伤功能中并不发挥作用。NHL特异性反应性T细胞株的特异性杀伤功能主要依赖于MHC I类分子限制的CD8+ T细胞。NHL表达的B7-H4抑制NHL特异性反应性T细胞的细胞毒性杀伤功能，抑制NHL表达的B7-H4促进T细胞免疫应答并提高NHL特异性反应性T细胞对肿瘤细胞的杀伤作用。肿瘤相关巨噬细胞通过上调B7-H4的表达，介导NHL耐受NHL特异性反应性T细胞株的细胞毒性杀伤作用，发生免疫逃逸。.因此，B7-H4是抑制NHL宿主抗肿瘤免疫应答的重要负调控因素，靶向肿瘤细胞表达的B7-H4可能为NHL患者提供治疗新策略。