PML/RARa融合蛋白DNA结合功能域与其细胞转化能力的相关性研究

PML/RARa融合蛋白被认为是引起细胞恶性转化并最终导致急性早幼粒细胞性白血病 (Acute Promyelocytic Leukemia，APL)的分子基础。而受PML/RARa调控的基因多而复杂，既有直接结合而调控的，亦有间接调控的，至今尚未完全确定。本课题将以PML/RARa直接结合DNA的特性为切入点，研究其结合DNA能力与造血细胞恶性转化的关系，以揭示 PML/RARa直接和间接调控的靶基因在APL发生过程中的作用，以期发现对白血病细胞自我更新、异常增殖或分化障碍起作用的关键基因或信号通路。这将进一步揭示APL的发病机制，为临床治疗提供靶点， 并为其它种类血液肿瘤的研究开创新思路。

PML/RARA是诱发急性早幼粒细胞白血病（APL）中的主要致癌蛋白。它通过蛋白相互作用招募转录抑制因子到靶基因处抑制基因的转录，引起造血细胞分化阻滞和恶性转化，诱导白血病的发生。然而，PML/RARA的DNA结合功能域在细胞恶性转化中的作用仍不十分清楚。本课题在小鼠骨髓原始造血细胞中过表达DNA结合能力缺失的PML/RARA突变体。结果显示，转化的造血细胞分化成熟，而且其集落形成能力缺陷，不能长期传代生长。进一步实验显示，DNA结合能力缺失的PML/RARA突变体不影响维甲酸依赖的基因的转录活性，而且突变体和野生型PML/RARA在细胞核内的定位并无显著差异，提示PML核小体的完整性与造血细胞转化可能并不直接相关。本研究结果直接显示PML/RARA的DNA结合功能域的为造血细胞恶性转化所必需，提示PML/RARA直接结合的靶基因不仅影响造血细胞的分化，也参与细胞的异常增殖和自我更新，而且后者可能在APL发生中发挥更重要的作用。