优化CAR设计靶向CD58异常弥漫大B细胞淋巴瘤及机制研究

Diffuse large B cell lymphoma (DLBCL) is a group of highly heterogeneous disorders with differing morphology, biological behavior and clinical features. Base on accurate risk stratification and individualized therapy, it has become increasingly recognized that DLBCL is curable. However, 40% cases of DLBCL remained recurrent or relapsed after treatment,suggesting there are some special subtypes of DLBCL still not to be identified and it is also difficult to overcome this subtype DLBCL. Using next generation sequencing and copy number analysis ,17.8% cases of DLBCL were found mutation and reduced copy number of CD58 gene,resulting poor clinical outcome. Because CD58 gene encodes a molecule involved in T and natural killer cell-mediated responses,the NK and T cells mediated antitumor immune responses are influenced by the aberration of CD58 gene. This study will establish the animal model of DLBCL with CD58 mutation, We plan to explore the optimized chimeric antigen receptors modified immune cells for the treatment of this subtype DLBCL with CD58 aberration and to provide a new strategy for immunotherapy for lymphoma.

弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）是一组高度异质性的恶性肿瘤。基于精确分层和预后评估系统的个体化治疗使DLBCL大多能够被治愈。但仍有40%的DLBCL难以缓解或治疗后复发，提示仍有特殊的亚型未能被识别，用现有的治疗手段也难以治愈这些类型的淋巴瘤。申请人所在的项目组利用高通量的二代测序技术对200余例DLBCL进行了28个基因的基因突变和拷贝数分析，发现：免疫调控分子CD58的基因突变和拷贝数减少病例约占17.8%，这部分病例临床预后较差，成为具有独特标志的一大类型。而研究证实：CD58分子影响T细胞和NK细胞介导的抗肿瘤免疫。本课题将建立CD58突变的DLBCL模型和动物模型，探讨针对CD58基因异常弥漫大B细胞淋巴瘤，优化的嵌合抗原受体修饰的免疫细胞的治疗作用及其机制探索，为淋巴瘤的免疫治疗提供新的策略。

弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）是一组高度异质性的恶性肿瘤。基于精确分层和预后评估系统的个体化治疗使DLBCL大多能够被治愈。但仍有40%的DLBCL难以缓解或治疗后复发，提示仍有特殊的亚型未能被识别，用现有的治疗手段也难以治愈这些类型的淋巴瘤。具有免疫调控分子CD58突变的弥漫大B细胞淋巴瘤临床预后较差。目前抗原嵌合受体T细胞治疗（CAR-T）是治愈这一类型淋巴瘤的有效治疗手段。但是CART细胞治疗过程中本身存在CART细胞耗竭，作用不持久从而导致复发等问题。本研究建立了CD58 突变的细胞模型和动物模型，分析了CD58突变对T细胞和NK细胞增殖和杀伤功能的影响，得出结论：CD58突变进而影响CD58蛋白表达，由于CD58为存在于体内抗原提呈细胞表面的分化抗原，是CD2的天然配体，其主要功能是与T和NK细胞表面的CD2受体结合，提供T和NK细胞活化的共刺激信号，CD58蛋白的表达缺失影响共刺激信号，从而削弱了T细胞和NK细胞的功能。研究中我们发现淋巴瘤患者体外培养的T细胞CD58的表达呈先上升后连续下降趋势，CD19 CART细胞，经流式细胞检测随着CART细胞的体外培养，CART细胞表面CD58表达减弱，增殖和杀伤能力减低。体内动物实验证实：过表达CD58的CAR19 T细胞对CD58突变的淋巴瘤动物模型具有更强更持久的杀瘤效应。我们结果提示：CD58是淋巴瘤免疫调控的重要分子，通过设计优化的过表达CD58CAR19 T细胞可以减少 CART 细胞的耗竭，增强CART细胞功能，有效逆转具有免疫调控分子CD58突变的弥漫大B细胞淋巴瘤临床预后，具有重要的临床应用价值。