α晶状体蛋白在激素性白内障发病机制中作用的研究

Glucocorticoids have been used long-term for patients who suffer with allergies, autoimmune disease or have had an organ transplant.For these patients ,they are more easily suffered from one of complications resulted by glucocorticoid namely glucocorticoid induced cataract(GIC) and the mechanism have not been elucidated.We have studied that pathogenesis process of GIC, kinds of crystalline were very fragile under the role of glucocorticoid which could resulted lose of the key role. But,on the basis of model in vitro, the study of the role and mechanism of αA、αB-crystalline in the pathogenesis of GIC, there have not reports in domestic. Our subject plan to establish HLECs cells which over-expressed αA、αB-crystalline and observe the influence ofαA、αB-crystalline on cellular apoptosis、proliferation、mitochondria signal pathway and related lncRNA expressed variation. At the same time, we collected lens anterior capsular tissue of dozens of GIC patients and normal persons and from new aspect,we will clarify the molecular mechanism of α crystalline in the pathogenesis process GIC and provide new target for preventing and curing GIC.

过敏、自身免疫性疾病或器官移植术后的患者长期使用糖皮质激素容易发生的并发症，称为激素性白内障（ GIC），机制尚未彻底阐明。我们曾研究过在GIC发病过程中，多种晶状体蛋白在糖皮质激素的作用下非常脆弱，并且会导致其重要功能的丧失。但是，在体外模型的基础上，研究αA、αB-晶状体蛋白在GIC发病中的作用和分子机制，迄今国内外尚无报道。 本课题拟通过建立αA、αB-晶状体蛋白过表达HLECs细胞，观察不同浓度地塞米松作用下，αA、αB-晶状体蛋白过表达对细胞凋亡、增殖、线粒体信号通路以及相关lncRNA的表达变化，同时收集数十例激素性白内障患者和正常人的晶状体前囊膜，从新的视角阐明α晶状体蛋白在GIC 发生过程中的分子机制，并为GIC的防治提供新靶点。

为了识别α-晶状体蛋白的保护和抗凋亡作用，我们在人类晶状体上皮细胞（HLECs）中建立了稳定的αA-和αB-晶状体蛋白过表达，并在四个时间段内使用四种浓度检测出9种相关的凋亡蛋白。根据western blot结果，我们确定了最重要的暴露因子和细胞类型，并进行了长链非编码RNA（lncRNA）和mRNA芯片扫描。芯片测定结果也通过实时PCR得到验证。我们发现，αA-和αB-晶状体蛋白与三种抗凋亡蛋白热休克蛋白60（HSP60）、Survivine和P53的表达有密切关系。然而，在HLECs（αA -晶状体蛋白过度表达）和HLECs（αB-晶状体蛋白过度表达）中，细胞色素C、Samc、P65和Fas的表达没有显著变化。继 lncRNA 和 mRNA 芯片扫描和深度分析之后，我们发现，过度表达的αA-晶体可以增加lnc-TMPRS15、TMPRS15和相关CDH12的表达，并可以减少HSD11B1、lnc-RNF13-2和lnc-cdh2-1的表达，这可能导致HSP60、Survivine和P53等抗凋亡蛋白的表达显著增加。结果表明，αA -晶状体蛋白促进一些抗凋亡蛋白的表达。lnc-TMPRS15发挥了非常重要的作用，为糖皮质激素白内障的发病机制提供了理论依据。