分化型甲状腺癌相关蛋白异常糖基化与血清学早期诊断

分化型甲状腺癌是内分泌腺最常见恶性肿瘤，发病率逐年上升。其疗效与临床分期密切相关，寻找早期分化型甲状腺癌的特异性标志物一直是研究热点。课题组前期研究发现分化型甲状腺癌患者血清Galectin-3和 HBME-1表达上调，为验证及提高诊断特异性，实现医学转化，进一步研究分化型甲状腺癌患者血清Galectin-3、 HBME-1和甲状腺球蛋白异常糖基化修饰。首先无血清培养甲状腺良性结节原代细胞、分化型和未分化甲状腺癌细胞系，检测上清液中上述蛋白糖基化修饰和细胞糖基化转移酶；在正常人、甲状腺良性结节、分化型和未分化型甲状腺癌患者血清检测上述蛋白的糖基化修饰和病变组织标本的糖基化修饰转移酶；最后在社区人群，从Galectin-3和 HBME-1表达丰度及上述三个蛋白异常糖基化修饰分别筛查随访，评估两种检测方法的特异性和敏感性。该项研究可望实现分化型甲状腺癌的早期诊断，为筛选其药物治疗提供新的靶点。

为了深入认识巨球蛋白和转铁蛋白的糖基化在甲状腺癌发生中的作用以及它们对甲状腺癌的诊断意义，同时依据研究经费状况，本研究对20对健康人和甲状腺癌患者血液中的巨球蛋白和转铁蛋白的糖基化进行的研究。具体实验路线如下：本研究首先采用本课题组已经建立的多维凝胶分离系统分离健康人和甲状腺癌患者血清中的巨球蛋白和转铁蛋白，利用胰蛋白酶酶解这些蛋白，之后采用本课题组建立的糖肽分离技术方法分离富集糖肽，采用高性能傅立叶变换离子回旋共振质谱仪鉴定上述富集得到的糖肽，研究结果表明巨球蛋白和转铁蛋白的糖基化状态与甲状腺癌的发生密切相关.一系列具有不同唾液酸化修饰的糖肽被检测到。甲状腺癌患者血清中巨球蛋白和转铁蛋白的唾液酸化比值明显高于正常人群。总之，甲状腺癌患者血液中的巨球蛋白和转铁蛋白唾液酸化水平的明显升高具有重要的临床诊断意义。