EGFL7通过EGFR信号通路促进胶质瘤血管新生的作用及分子机制研究

Angiogenesis plays crucial roles in oncogenesis, invasion and metastasis. Our previous data showed an abnormally high expression of EGF17 in endothelial and tumor cells in human malignant gliomas. The expression level is positively correlated with tumor grade, proliferation and angiogenesis. The results of DNA microarray suggest that EGF17 downstream signaling network primarily involves the EGFR pathway. In this project, we will study the effects of EGF17 on glioma proliferation, invasion , metastasis and neovascularization using RNA interference, gene transfection and orthotopic nude mouse models, and explore the relationship between EGF17 and EGFR, FAK, PI3K and RAS by immunoprecipitation, immunocytochemistry and protein-protein interaction analysis. We will also study the feedback regulation of EGFR pathway on the angiogenesis effects of EGF17. Our project will further clarify the mechanism of EGF17 on tumor neovascularization regulation, provide novel diagnostic and therapeutic targets, and offer new insights for glioma prevention and treatment research

血管新生在肿瘤生长、侵袭和转移过程中起重要作用。我们前期研究发现EGFL7在人脑恶性胶质瘤血管内皮细胞及肿瘤细胞中均存在异常的高表达，并且与肿瘤的恶性程度、增殖及血管新生有着密切的正相关性，基因芯片分析提示EGFL7 的下游调控分子网络主要涉及表皮生长因子受体(EGFR)传导通路。本项目拟采用RNA干扰、基因转染和裸鼠原位瘤模型等技术研究EGF17对胶质瘤增殖、侵袭、转移和血管生成的影响；免疫共沉淀、免疫组织化学、蛋白质相互作用分析等技术明确EGF17与EGFR、FAK、PI3K、RAS的关系；并反向研究EGFR通路等对EGF17促血管生成作用的影响。这些研究有助于进一步阐明EGF17调控胶质瘤血管新生调控机制，为临床诊疗提供新靶点，为胶质瘤的防治研究提供依据和新线索，具有重要的理论和临床意义。

血管新生在肿瘤生长、侵袭和转移过程中起重要作用。我们前期研究发现EGFL7在人脑恶性胶质瘤血管内皮细胞及肿瘤细胞中均存在异常的高表达，并且与肿瘤的恶性程度、增殖及血管新生有着密切的正相关性，基因芯片分析提示EGFL7 的下游调控分子网络主要涉及表皮生长因子受体(EGFR)传导通路。本项目在多个细胞模型中用EGFL7蛋白抗体进行免疫共沉淀CoIP，我们发现EGFL7可与EGFRwt蛋白双向结合，并激活EGFR下游通路，EGFL7与EGFRvIII蛋白无相互作用，提示了EGFL7在胶质瘤中通过EGFR通路，促进肿瘤血管新生发生发展与侵袭转移的重要作用；我们发现MEK和PKM2是EGFL7的间接作用靶点，PKM2入核是EGFR/AKT和诸多胶质瘤相关癌基因表达的核心转录事件，EGFL7基因启动子存在PKM2/β-catenin结合位点；在动物实验中EGFL7同样能够激活EGFR的下游信号通路，胶质瘤裸鼠原位模型内的U87细胞能够通过分泌EGFL7增强胶质瘤的侵袭与增殖能力。脑胶质瘤（glioma）是由神经外胚叶衍化而来的胶质细胞发生的恶性肿瘤，是最常见的中枢神经系统原发性肿瘤，对于其发生发展的机制研究及寻找有效的治疗手段一直备受各国神经科学工作者的关注。本项目不仅确定EGFL7对人脑恶性胶质瘤血管生成及增殖侵袭等方面的作用，同时还进一步揭示了EGFL7通过EGFR信号通路促进胶质瘤血管新生的分子机制，为临床诊疗提供新靶点，为胶质瘤的防治研究提供依据和新线索，具有重要的理论和临床意义。