LncRNA SNHG11在乙肝相关性肝癌发生发展中的作用

Hepatocellular carcinoma (HCC) is one of the most prevalent malignant neoplasms woldwide. Hepatitis B virus (HBV) is one of the major risk factors for occurrence of HCC. HBV infection increases the risk of HCC significantly. We found that HBV may play a role via regulating long non-coding RNA (lncRNA). Identifying differences between two groups of HCC with HBV and HCC without HBV, we found that lncRNA SNHG11(Homo sapiens small nucleolar RNA host gene 11) presented specific low expression in HBV-related HCC by the lncRNA microarray and CLDN1 presented specific high expression by gene microarray. Therefore, we assume that HBV effects CLDN1 expression in the tumor process by regulating lncRNA SNHG11. So we plan to establish a lncRNA SNHG11 sponge transgenic mice model with HCC. Through the virus/plasmid transfection and siRNA interference, we observe whether the regulation of lncRNA SNHG11 plays a role of the expression of CLDN1 and its downstream signaling pathways reversely and affects the malignant phenotypes and progress of HCC. And we detect lncRNA SNHG11 transcription and CLDN1 expression in the 200 pairs of clinical samples, combine with overall survival and tumor recurrence in these HCC patients, and reveal the role of the lncRNA SNHG11 in the occurrence and progress of HBV-related HCC.

肝癌是最常见的恶性肿瘤之一，乙肝病毒感染会显著增加罹患肝癌的风险。我们前期研究发现HBV可能通过调控LncRNA发挥作用，为探寻机制我们选取有乙肝和无乙肝的两组肝癌进行芯片筛选，结果提示LncRNA SNHG11和CLDN1在肝癌中呈特异性差异表达，且二者呈显著负相关。故设想LncRNA SNHG11是否通过调控CLDN1影响肝癌的进程？本课题拟构建LncRNA SNHG11 sponge转基因小鼠荷瘤模型；通过病毒/质粒转染上调和siRNA干扰下调LncRNA SNHG11，观察该变化是否反向调控CLDN1表达及下游信号通路，从而影响肝癌的恶性表型和进展；同时通过200例临床样本检测LncRNA SNHG11转录及CLDN1的表达情况，结合肝癌患者总体生存期及肿瘤复发情况，探寻LncRNA SNHG11与肝癌预后的关系，揭示乙肝相关性肝癌发生发展中关键LncRNA的作用。

肝癌是最常见的恶性肿瘤之一，乙肝病毒（HBV）感染会显著增加罹患肝癌的风险。尤其是我国，乙肝病毒相关性肝癌占所有肝癌患者的比例达到80%以上。揭示乙肝病毒相关性肝癌的发病机制对于乙肝病毒相关性肝癌的特异性治疗及诊断具有重大意义。我们前期研究选取有乙肝病毒和无乙肝病毒的两组肝癌进行芯片筛选发现，乙肝病毒相关性肝癌具有大量的特异异常表达lncNRA分子，提示lncRNA在HBV诱导的肝癌发生中发挥着重要的作用。在此基础上，本项目研究揭示HBV相关肝癌特异性lncRNA-SNHG11在肝癌发生中的作用机制，探讨其作为HBV相关肝癌特异性诊断和治疗靶点的可能性。前期研究发现LncRNA SNHG11 和 CLDN1 在肝癌中呈特异性差异表达，且二者呈显著负相关，提示SNHG11 有可能通过CLDN1参与了肝癌的发生。后续研究结果发现SNHG11 和CLDN1同肝癌的发生都具有一定的关联性，其中SNHG11的表达同HBV相关肝癌的发生具有特异的关联性。通过体外肿瘤细胞系和体内小鼠肿瘤模型研究发现SNHG11 具有抑制肿瘤细胞增殖和转移的能力，且其发挥功能不涉及到肿瘤细胞的细胞周期调控。另外，发现SNHG11定位在肿瘤细胞的细胞质中，并不具有直接调控CLDN1表达的作用。RNA-pull down 联合质谱分析发现SNHG11能够结合到CXCR4和PGAM5蛋白上，提示SNHG11有可能通过这些分子在肝癌的发生中发挥调控作用。在SNHG11的表达机制上，发现HBV核心蛋白HBX蛋白能够抑制肝癌细胞中SNHG11的表达，进一步说明SNHG11有可能作为HBV 相关肝癌的特异性治疗或诊断靶分子。本研究发现了HBV 相关肝癌特异性异常表lncRNA分子SNHG11，验证了其抑制肝癌细胞增殖和转移的生物学功能并揭示了其相关分子机制。为SNHG11作为HBV相关性肝癌的特异性诊疗靶点提供了理论和实验依据。