NPY/VEGF介导高原环境动脉粥样硬化斑块内血管新生的机制研究

The occurrence of acute coronary syndrome (ACS) in the Tibetan Plateau may be related to the natural environment of hypoxic and cold, but its exact mechanism is not very clear. Hypoxia or cold can promote the secretion of neuropeptide (NPY). In the meanwhile, Our preliminary exploration showed that the NPY stimulated atherosclerotic plaque growth and angiogenesis. Hereby we hypothesize that altitude environment may promote plaque angiogenesis by NPY-induced upregulation of vascular endothelial growth factor(VEGF) expression and thus leading to the rupture of Atherosclerosis plaque and consequently the occurrence of ACS. The present study aims to investigate the molecular mechanism of ACS, by employing EMSA, qRT-PCR, CHIP methods, using different gene knockout mice models and mouse aortic endothelial cells. The results are expected to provide new insights and theoretical basis toward making effective clinical strategies for preventing ACS.

青藏高原地区，急性冠脉综合征（ACS）的发生可能与其缺氧寒冷的自然环境相关，但其确切机制尚不十分清楚。缺氧或者寒冷均可以促进神经肽（NPY）的分泌，同时，我们前期研究发现：神经肽（NPY）分泌增加，促进AS斑块体积增大，斑块内血管新生。由此，我们进一步提出：高原环境可以通过NPY上调血管内皮细胞VEGF表达，促进AS斑块内血管新生，从而增加AS斑块破裂的风险，导致ACS的发生。本研究拟以多种基因敲除小鼠模型和小鼠主动脉内皮细胞为研究对象，通过电泳迁移率变动实验（EMSA）、染色质免疫沉淀技术（CHIP）、荧光定量PCR（qRT-PCR）等分子生物学技术，研究高原环境通过NPY上调血管内皮细胞VEGF表达的机制，明确其在小鼠AS斑块内血管新生中的作用，从而进一步完善高原环境条件下ACS的发病机制，为临床进一步制定预防ACS发病新策略提供新的思路与理论依据。

摘要.背景.研究显示，急性缺氧或低温均可以明显加重ASCVD患者的病情，尤其提高了急性冠脉综合征（Acute cornary syndrome，ACS）的发病率。因此，深入探讨高原地区特有的持续低压性缺氧环境对ASCVD的具体影响及其机制，对于减少青藏高原地区ACS不良事件的发生率有着十分重要的临床意义。.主要研究内容.1.参照本项目组前期建立的方法构建ApoE-/-小鼠低压性缺氧模型并分组.2.实验动物的标本采集与检测.3.细胞实验验证NPY和缺氧刺激对主动脉血管内皮细胞和巨噬细胞的影响.结果.1. 持续低压性缺氧可以促进动脉粥样硬化斑块的形成，损伤斑块稳定性。.2. 持续低压性缺氧上调了NPY-Y2受体和VEGF表达，促进了斑块内血管新生和炎症因子的浸润。.3. NPY刺激促进了主动脉内皮细胞的血管生成，缺氧刺激促进了Raw264.7细胞向M2型巨噬细胞方向极化。而NPY+缺氧联合刺激对Raw264.7细胞的极化状态的影响更为显著。单独的NPY刺激不影响Raw264.7细胞的状态。.科学意义.NPY的表达量在进入高原后会出现急剧的变化，而实验动物主动脉斑块内NPY-Y2受体表达量的升高提示NPY在斑块的发生发展过程中起着重要的作用。其促进斑块内血管新生和巨噬细胞浸润的作用会加重斑块的不稳定性，提高ACS的发病率。本研究的结果为缺氧环境下预防ACS发病提供了新的思路